ИСТИНА

Обработка клеток ингибиторами ДНК-топоизомераз, которые широко используются в химиотерапии рака, приводит к возникновению двуцепочечных разрывов ДНК. При нарушении их репарации происходит сшивка фрагментов разных хромосом, что в некоторых случаях приводит к вторичному онкогенезу. Механизмы образования межхромосомных транслокаций пока остаются неясными. Мы обрабатывали клетки линии Jurkat этопозидом или камптотецином и готовили трехмерные препараты ядер, после чего проводили гибридизацию с флуоресцентно мечеными двуцветными зондами против концов протоонкогенов MLL и AML1, а также с флуоресцентным зондом третьего цвета против хромосомной террритории, где в норме находится исследуемый ген (11 и 21 хромосомы, соответственно). Полученные на конфокальном микроскопе фотографии обрабатывали с помощью компьютерной программы, детектирующей сигналы на фотографиях. В результате обработки клеток этопозидом внутри аллелей MLL и AML1 иногда образуется разрыв, и его концы отдаляются друг от друга в пространстве ядра. Мы проанализировали взаимное расположение концов протоонкогенов и границ соответствующих хромосомных территорий. Оказалось, что "разорванные" концы значительно чаще локализуются на краю или даже вне хромосомной территории, по сравнению с неразорванными аллелями MLL и AML1. Обработка клеток камптотецином не приводила к возникновению двуцепочечных разрывов внутри генов MLL и AML1. Полученные результаты свидетельствуют, что "разорванные" протоонкогены обладают повышенной мобильностью в пространстве ядра. Причем концы разрыва имеют тенденцию оказываться на краю хромосомной территории, где они могут легко встретиться с партнером по межхромосомной перестройке.