![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Оливомицин А является перспективным антибиотиком группы ауреоловой кислоты, обладающим противоопухолевой активностью [3]. Он способен связываться с малой бороздкой ДНК в GC-богатых участках в виде Mg2+-содержащих комплексов. Ранее мы показали, что малобороздочные лиганды способны ингибировать эукариотическую ДНКметилтрансферазу (МТазу) Dnmt3a, осуществляющую de novo метилирование ДНК по 5 положению цитозина-мишени в CpG-участках [1]. Метилирование ДНК является важной формой эпигенетической регуляции и контролирует многие клеточные процессы. В данной работе исследовалось влияние оливомицина А и его производного LCTA-1599 [2] на функционирование Dnmt3a как один из возможных аспектов противоопухолевого действия антибиотика. С помощью флуоресцентно-меченных ДНК-субстратов мы подобрали оптимальные условия для связывания оливомицина А с ДНК, в том числе концентрацию ионов Mg2+, обеспечивающую связывание антибиотика и не нарушающую функционирование Dnmt3a. Оливомицин А практически не мешает образованию ферментсубстратного комплекса и не способен связываться с МТазой. Используя разработанный нами метод определения уровня метилирования ДНК in vitro, мы показали ингибирование реакции метилирования как оливомицином А, так и LCTA-1599, с константами IC50, равными 6±1 мкМ и 7,1±0,7 мкМ, соответственно. Другие малобороздочные лиганды, ранее исследованные в нашей лаборатории, показали сравнимые значения IC50. Ингибирование реакции метилирования может быть связано с затруднением движения каталитической петли МТазы Dnmt3a, важной стадии реакции метилирования, затрагивающей малую бороздку ДНК. Результаты данной работы свидетельствуют о возможном эпигенетическом вкладе в механизм противоопухолевого действия антибиотиков группы ауреоловой кислоты. Работа поддержана грантом РФФИ 16-04-01087A. Литература 1. Cherepanova, N.A., et al. Dimeric bisbenzimidazoles inhibit the DNA methylation catalyzed by the murine Dnmt3a catalytic domain. J. Enzyme Inhib. Med. Chem. 2011, 26(2), 295-300. 2. Tevyashova, A.N. et al. Modification of olivomycin A at the side chain of the aglycon yields the derivative with perspective antitumor characteristics. Bioorg. Med. Chem. 2011, 19(24), 7387-7393. 3. Tevyashova, A.N., et al. Role of the acyl groups in carbohydrate chains in cytotoxic properties of olivomycin A. J. Antibiot. 2013, 66(9), 523–530.