ИСТИНА

ВВЕДЕНИЕ. Растительные гормоны – это органические вещества, выделяемые клетками растений и действующие в низкой концентрации как регуляторы роста и дифференцировки. Жасмоновая кислота (ЖК) участвует в ответе растений на различные повреждения, а абсцизовая кислота (АБК) контролирует регуляцию перехода в состояние покоя при биотическом и абиотическом стрессе. Из данных литературы известно, что многие растительные гормоны способны оказывать влияние на жизнеспособность, пролиферацию, дифференцировку, синтетическую и секреторную активность клеток животных. Изучение действия растительных гормонов на клетки человека как в норме, так и при развитии патологических состояний может внести значительный вклад в создание новых подходов к разработке лекарственных препаратов растительного происхождения. В качестве объектов исследования использовались культивируемые кератиноциты человека HaCaT и клетки эпидермоидной карциномы человека А431. Ранее полученные нами данные показывают, что ЖК (2 мМ) усиливает интенсивность общего белкового синтеза в обоих типах клеток, а АБК (2 мМ) – только в клетках А431, однако до сих пор нет данных о том, с какими конкретно белками это может быть связано. Целью данной работы было исследовать с помощью методов иммуноцитохимии и вестерн-блоттинга присутствие и локализацию белка инволюкрина (маркера дифференцировки кератиноцитов) в нормальных и опухолевых клетках эпителиального происхождения после обработки растительными гормонами. Инволюкрин синтезируется на свободных полисомах и при выявлении с помощью антител дает цитоплазматическое окрашивание разной интенсивности в клетках линии НаСаТ, что предположительно может отражать степень дифференцировки клеток. В клетках А431 цитоплазматическое окрашивание имеют единичные клетки (предположительно являющиеся дифференцированными), тогда как в остальных выявляются перинуклеарные структуры, по морфологии напоминающие комплекс Гольджи. Было показано, что после инкубации с ЖК число клеток линии А431 с цитоплазматическим окрашиванием достоверно возрастает в 2,13 раза. В клетках HaCaT растительные гормоны достоверно на интенсивность окрашивания не влияли. Дифференцированные клетки могут чаще открепляться от монослоя и попадать в среду культивирования. В связи с этим мы исследовали действие растительных гормонов на 2 клеточные фракции – клетки, прикрепленные к субстрату, и клетки, открепившиеся от субстрата. С помощью иммуноблоттинга мы обнаружили, что в опухолевых клетках, прикрепленных к субстрату, уровень экспрессии инволюкрина повышается после инкубации как с ЖК, так и с АБК. Таким образом, можно предположить, что ранее показанное нами усиление синтетической активности в клетках А431 при действии ЖК или АБК связано с повышением уровня экспрессии инволюкрина.