ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
В данном исследовании использовали просвечивающую криоэлектронную микроскопию для изучения липосом, содержащих грамицидин А и мутантный грамицидин А с лизином в позиции 3 ([Lys3]gA). Изображения липосом с различными вариантами грамицидина получали при 52000-кратном увеличении в 120-kV Tecnai G-12 Spirit (FEI) микроскопе с дозой электронов в районе 10 e/A2 и дефокусом 3,5 мкм. В отличии от липосом с грамицидином, липосомы с [Lys3]gA имели в составе электронноплотные кластеры. Было собрано около 3000 частиц мембран липосом с размерами 64x64 пикселя. Дальнейший анализ производился при помощи программы IMAGIC-5. Реконструкция показала наиболее вероятное пентамерное строение кластеров ([Lys3]gA, с центральной порой порядка 3А в диаметре. В соответствии с предлагаемой моделью неселективной поры, электронные изображения [Lys3]gA в липосоме были аппроксимированы пентамером, состоящим из антипараллельных правозакрученных димеров DH (пентамер состоит из 10 мономеров), стабилизированным посредством взаимодействия большого количества триптофанов и катион-пи взаимодействием между триптофаном и лизином соседних димеров. Работа поддержана грантом РНФ (№14-14-00234).