ИСТИНА

Определение охратоксина А методом иммуноферментного анализа Тугаринова М.А. Российский химико-технологический университет им. Д.И. Менделеева, Москва, Россия dmt1379@mail.ru Охратоксин А (ОТА) природный микотоксин, продуцируемый грибами Aspergillus ochraceus, Penicillium verrucosum и Penicillium nordicum. ОТА классифицирован как потенциальный канцероген, является слабым мутагеном и проявляет иммунодепрессивный и иммунотоксичный эффект. LD50 для лабораторных животных при однократном введении внутрь 20-28 мг/кг массы животного, для цыплят 7-дневного возраста 11-15 мг/кг. Для определения содержания ОТА применялся метод иммуноферментного анализа (ИФА). В работе использовался набор реагентов «ОХРАТОКСИН-ИФА» производства ООО «ХЕМА», определение производилось на фотометре для ИФА ЭФОС 9305. Объектами исследования были орехи и сухофрукты из разных стран: Россия, Индия, Китай и Иран. Образцы измельчали и смешивали с метиловым спиртом и буферным раствором SP924. Центрифугировали смесь, затем отбирали водно-метанольную фазу экстракта. Готовили калибровочные пробы, планшет с нужным количеством стрипов, в соответствующие лунки вносили дубликаты калибровочных проб и экстрактов. В каждую лунку вносили раствор антител, перемешивали и термостатировали планшет в течение 60 минут при температуре +37 °C. Лунки отмывали, добавляли конъюгат и термостатировали планшет в течение 30 минут при температуре +37 °C. Лунки отмывали, добавляли раствор субстрата и термостатировали планшет в течение 10-20 минут при температуре +37 °C. Во все лунки добавляли стоп-реагент. Измеряли величину оптической плотности содержимого лунок планшета на фотометре при длине волны 450 нм. Содержание ОТА в исследуемых образцах определялось по градуировочному графику. Во всех образцах орехов и сухофруктов был обнаружен охратоксин А, в 7 образцах из 27 обнаружены концентрации ОТА превышающие допустимые. Обнаруженные концентрации лежат в диапазоне 1-22 ppb. Работа выполнена при финансовой поддержке Министерства образования и науки Российской Федерации, уникальный идентификатор проекта RFMEFI60717X0185.