ИСТИНА

Одним из путей профилактики и лечения нейродегенеративных заболеваний амилоидной природы является использование антител, взаимодействующих с амилоидогенными белками (прионом, бета-амилоидным пептидом, альфа-синуклеином и т.д.). Олигомеризация и, особенно, фибриллизация амилоидогенных белков осложняет их использование в качестве антигенов при получении антител (в том числе, аутоантител), прежде всего из-за экранирования нужных эпитопов в составе крупных агрегатов. Известны примеры получения поперечно-сшитых димеров альфа-синуклеина с помощью сложной процедуры, заключающейся в модификации тирозиновых остатков. Нами были получены рекомбинантные формы альфа-синуклеина с точечными заменами тирозиновых остатков на остатки цистеина. Полученные рекомбинантные формы склонны к образованию димеров, в которых мономеры синуклеина соединены дисульфидными связями. При ассоциации димеров друг с другом образуется достаточно гомогенная популяция частиц диаметром 98 нм, причем распад частиц на димеры происходит в мягких условиях (разведение, использование небольших концентраций детергентов, добавление адъюванта, используемого для иммунизации). Подкожная иммунизация кроликов рекомбинатным синуклеином (с полным адъювантом Френда) привела к появлению антител против нативного и денатурированного синуклеина и позволила получить моноспецифические антитела с помощью иммуноаффинной хроматографии на иммобилизованном синуклеине. Антитела могут быть использованы для детекции различных форм синуклеина в образцах тканей. Была изучена возможность использования полученных антител против синуклеина для разрушения агрегатов этого амилодогенного белка.