ИСТИНА

В литературе описан процесс спонтанной активации дыхания митохондрий после окончания поглощения ими Са2+ в присутствии фосфата, с достижением скоростей, характерных для разобщенного дыхания. Эти данные пока не имеют сложившегося объяснения и это явление и его последствия объединяется в литературе термином «пора» или «мегаканал». Нами были получены данные зависимости кинетики спонтанной активации дыхания митохондрий от времени преинкубации (0,5 - 10 мин) до добавки Са2+. Оставалось неясным, чем обусловлено изменение этой кинетики: процессом сукцинат-зависимого дыхания в отсутствии Са2+ или диссоциацией какого-либо фактора, способствующего открытию мегаканала. Нами было поставлено две серии опытов, в которых преинкубация производилась в присутствии сукцината и без него. Порции митохондрий, изолированных из печени крысы методом дифференциального центрифугирования (2,4 мг белка) помещали в 2 мл среды, содержавшей 0.1 М сахарозу, 75 мМ KCl, 10 мМ HEPES (pН 7.4), 5 мM КН2PO4, 2 мМ МgCl2, 1 мкМ ротенон. В первой серии через различные промежутки в среду вносили смесь 10 мM сукцината и 300 мкМ Са2+ (рис1-стр.51отчета). Во второй серии субстрат дыхания вносили за различные промежутки времени до добавки Са2+ , которая происходила на 6 мин преинкубации (рис2стр.55отчета). Оксидазную активность препарата митохондрий измеряли полярографически с помощью открытого вращающегося платинового электрода. Было обнаружено, что кинетика спонтанной активации практически не зависела от времени преинкубации без субстрата; и была показана ее ярко выраженная зависимость от времени сукцинат-зависимого дыхания в период преинкубации митохондрий, которое оказывало сопрягающее воздействие на митохондрий по мере возрастания его продолжительности, увеличивая коэффициент дыхательного контроля от 1 (0 мин) до 5 (6 мин) (с.52и56отчета). Эти результаты опровергают гипотезу о диссоциации какого-либо фактора, активирующего мегаканал, за время преинкубации. Механизм улучшения сопряженности митохондрий в результате сукцинат-зависимого дыхания еще подлежит исследованию.