ИСТИНА

Если количественное определение таксономического состава и интен- сивности протекания микробиологических процессов в почвенной микро- биологии не вызывает принципиальных методических затруднений, то ме- тоды определения физиологического состояния бактерий нуждаются в дальнейшем усовершенствовании. Существует несколько подходов к опре- делению физиологического состояния бактерий (люминесцентные красите- ли, позволяющие различить живые и мёртвые клетки по ферментативной активости, содержанию, рибонуклеиновых кислот рибосом и т. д.), нами был выбран подход, основанные на представление о физиологическом со- стояние как кинетической величины, определяемой из данных по началь- ному периоду роста бактерий на питательных средах. Суть метода заклю- чается в математической обработке кривых роста смешанных самопроиз- вольных бактериальных культур, внесённых просто в виде почвенной сус- пензии в жидкие питательные среды. Рост определяется в режиме реально го времени по изменению оптической плотности в питательных средах на фотометре. В качестве питательных сред могут быть применены различные жидкие микробиологические среды. Для получения большей информации, необходимо по завершении исследования роста в жидких средах проводить высев на агаризованные среды в чашки Петри, для дальнейшей идентиф кации микроорганизмов. Кинетический метод определения физиологического состояния бактерий in situ отличает от других методов возможность одновременного и инструментального определения функционального (тро- фического) разнообразия бактериального комплекса, физиологического со- стояния различных трофических групп бактерий, их кинетических пара- метров роста. Так же метод являясь своеобразным вариантом накопитель- ной культуры позволяет попутно выделить из исследуемого местообитания самых различных бактерий, которые нельзя выделить при непосредствен- ном высеве на агаризованные среды. Метод был успешно использован для решения широкого круга микробио- логических и экологических задач. В рамках поиска решения загадки консер- вации органического вещества в торфах (особенно верховых, по сравнению с низинными) нами было установлено, что бактериальные сообщества верховых торфяников отличаются большей продолжительностью лаг-фазы, более узким спектром потребляемых субстратов и меньшими значениями максимальной удельной скорости роста по сравнению с низинными торфяниками, что наряду с другими факторами приводит к относительно меньшей скорости разложения органического вещества в верховом торфе. Для определения допустимых норм загрязнения почв нефтепродуктами эти методом оценивали пороговых кон- центраций дизельного топлива, при которых происходит резкие перестройки в физиологическом состояние бактерий в почвах различного типа. Было уста- новлено, что в зависимости от типа почвы пороговые концентрации дизельно- го топлива колеблются в интервале 1-5 г/кг почвы. При исследованиях зоо- микробных взаимодействий в почвах на примере дождевых червей кинетиче- ский метод позволил проследить судьбу некоторых бактерий при пассаже че- рез пищеварительный тракт червя. Помимо этого был установлен факт увели- чения активности бактерий под влиянием дождевых червей как в свежих экс- крементах червя (копролитах) так и в вермикомпосте, по сравнению с тради- ционными компостами. Эти данные позволяют утверждать, что влияние дож- девых червей на микробный комплекс, сказывается не только на таксономиче- ском составе и интенсивности протекания микробиологических процессов в почвах, но и на физиологическое состояние микробов. Можно заключить, что кинетический метод определения физиологического состояния бактерий пер- спективен для дальнейшего усовершенствования. Автор благодарит за помощь д.б.н. Б.А. Вызова, к.б.н. Т.Г. Доброволь- скую, д.б.н. Е.Ю. Милановского, к.б.н. О.С. Кухаренко, к.б.н. В.В. Тихонова. Работа выполнена в рамках научной темы кафедры биологии почв факульте- та почвоведения МГУ «Биоразнообразие и ценотические связи почвенных микро- °Рганизмов в наземных экосистемах», гос. регистрационный номер 01 2011 п. • и пРи финансовой поддержке грантов РФФИ № 11-04-00580-а, №11-04- f ha' №11-04-00415-а и Гранта Президента РФ № МК-5552.2011.4