ИСТИНА

Одна из главных экологических функций естественных и антро- погенно-преобразованных почв - утилизация отмирающей биомассы. Эта функция реализуется процессами минерализации и гумификации органических соединений. Подобные биохимические процессы проте- кают под влиянием почвенных микроорганизмов: бактерий и грибов. Нормальное протекание биохимических процессов зависит не столько от таксономического состава микробного сообщества, сколько от их физиологического состояния. На современном этапе развития почвен-ной микробиологии имеющиеся методы не в полной мере позволяют определить физиологическое состояние гетеротрофных бактерий - очень важной для указанных процессов группы почвенной биоты. Разрабатываемый нами кинетический метод определения физио- логического состояния бактерий в почве основан па изучении физиоло- гического состояния микроорганизмов как кинетического параметра, определяемого по кривым начального роста на питательных средах. Суть метода заключается в изучении роста смешанных, самопроизволь- ных, периодических культур бактерий, возникающих при инокуляции жидких питательных микробиологических сред суспензией почвенных бактерий, выделенных непосредственно из почвы. Выделение осущест- вляется десорбцией бактерий встряхиванием почвенной суспензии на встряхивагеле типа «вортекс» с последующим осаждением мешающих почвенных частиц центрифугированием. Культивирование бактерий на средах проводится в 96-луночных планшетах для иммунологических тестов, сделанных из прозрачного, иизкосорбируюшего пластика. Рост детектируется автоматически в режиме реального времени турбидомет- рически, на специальной опытной установке, включающей климатиче- скую камеру, поддерживающую постоянную температуру и влажность, в которую помещён имунноферменгный анализатор, управляемый дис- танционно с персонального компьютера. Использование различных микробиологических питательных сред позволяет получить кинетиче- ский отклик различных групп бактерий. После проведения кинетиче- ского исследования обязательно производится высев из жидких на ага- ризованные среды, с целью идентификации бактерий, участвующих в кинетическом отклике на той или иной среде. Кинетический метод определения физиологического состояния бактерий in situ отличает от других аналогичных методов возможность одновременного и инструментального определения функционального (трофического) разнообразия бактериального комплекса, физиологиче- ского состояния различных трофических групп бактерий, их кинетиче- ских параметров роста (максимальная удельная скорость роста на пита- тельной среде), позволяющие определить экологические особенности исследуемого бактериального сообщества. Также метод, являясь свое- образным вариантом накопительной культуры, позволяет попутно вы- делить из исследуемого местообитания самых различных бактерий, ко- торые нельзя выделить при непосредственном высеве на агаризованные среды. Метод характеризуется хорошей точностью, воспроизводимо- стью и оригинальностью результатов, например: методом было уста- новлено, что влияние дождевых червей на физиологическое состояние оак1ериального сооошества почвы и вермикомпоств заключается в активизации бактериального сообщества, что выражается в большей метаболической подготовленноеiи бактерий потреблять биополимеры. Активизация в наибольшей степени выражена в сообществе свежих ко- пролитов дождевых червей. Работа выполнена в рамках научной темы кафедры биологии почв факультета почвоведения Ml«Биоразнообразие и ценотические связи почвенных микроорганизмов в наземных экосистемах», гос. реги- страционный номер 01 201 1 55420; и при финансовой поддержке [ран- тов РФФИ № 1 1 -04-00580-а. №1 1-04-0121-а, №1 1-04-004 1 5-а. а так же гранта Президента РФ № MK-5552.20I 1.4.