ИСТИНА

Макрофаги представляют собой клетки миелоидной линии, для которых характерна высокая гетерогенность и пластичность. Одним из свойств, обуславливающих пластичность макрофагов, является их способность к изменению фенотипа в провоспалительном (М1) и противовоспалительном (M2) направлениях. Многие заболевания (ожирение, атеросклероз и др.) связаны с развитием латентного воспаления, которое обусловлено привлечением макрофагов в ткань и их поляризацией по М1-фенотипу, поэтому поиск мишеней для изменения соотношения М1 и М2 макрофагов в тканевых популяциях является важной научной задачей. В нашей работе была проведена поляризация макрофагов RAW264.7 по М1- и М2- фенотипу по стандартной методике (с использованием бактериального липополисахарида (50 нг/мл) и интерферона γ (20 нг/мл) (М1-стимуляция) и с использованием интерлейкина-4 (50 нг/мл) (М2-стимуляция)). Полученные популяции охарактеризованы морфологически и с использованием ПЦР в реальном времени. В ходе работы была оценена экспрессия генов-маркеров TNFα, CXCL11, специфических для М1-макрофагов, и генов-маркеров IGF-1, ALOX15, специфических для М2- макрофагов. В качестве активатора PPARγ использовали препарат группы тиазолидиндионов розиглитазон, а в качестве активатора сиртуина 1 типа (SIRT1) — новый синтетический активатор DCHC (3-(2,4-дихлорфенил)-7-гидрокси-4Н-хромен-4- он). Методом МТТ выявили рабочую концентрацию используемых лигандов, провели поляризацию макрофагов в присутствии лигандов и охарактеризовали полученные популяции методом ПЦР в реальном времени по экспрессии генов-маркеров, указанных выше. В ходе работы было показано, что розиглитазон и DCHC не оказывают значимого влияния на жизнеспособность клеток линии RAW264.7. В ходе характеристики поляризованных макрофагов показано, что М1-макрофаги, поляризованные в присутствии DCHC и розиглитазона, обладают сниженным уровнем экспрессии провоспалительных маркеров (TNFα, CXCL11), а также обладают повышенным уровнем экспрессии противовоспалительных маркеров (IGF-1, ALOX15), что согласуется с данными литературы о ингибиторном воздействии сиртуина 1 типа, а также транскрипционного фактора PPARγ на основной воспалительный транскрипционный фактор NF-kB. Таким образом, сиртуин 1 типа и PPARγ являются перспективными мишенями для создания противовоспалительной терапии, которая может применяться в формате комбинированной терапии для лечения заболеваний, сопряженных с латентным воспалением. Работа поддержана грантом РФФИ No 15-04-07840