ИСТИНА

Теломераза представляет собой мультисубъединичный рибонуклеопротеиновый комплекс, ответственный за поддержание целостности генома в клетках эукариот. Представляет фундаментальный интерес механизм действия этого фермента. Кроме того, теломераза является важной фармакологической мишенью, поскольку бессмертие раковых клеток связано с экспрессией в них этого фермента, в отличие от большинства соматических клеток организма. Однако структура и молекулярный механизм действия теломеразы все еще недостаточно исследованы. Функция фермента основана на динамическом взаимодействии каталитической субъединицы (TERT) с теломеразной РНК (TER), теломерными участками ДНК и несколькими белками, входящими в состав рибонуклеопротеинового комплекса. В состав теломеразы дрожжей кроме TERT и TER входят регуляторные белковые субъединицы Est1 и Est3, необходимые для нормального функционирования фермента in vivo. В работе методом спектроскопии ЯМР исследованы N-концевой (TEN) домен TERT и субъединица Est3 из термотолерантных дрожжей Hansenula polymorpha. Выполнено практически полное отнесение химических сдвигов сигналов обоих белков. Определены структуры высокого разрешения этих белков в растворе и исследованы их динамические свойства. Изучены взаимодействия TEN-домена и Est3 с фрагментами РНК и ДНК, моделирующими вероятное окружение этих белков в теломеразе дрожжей. Полученные результаты позволяют предполагать, что TEN домен контролирует ограничение размера гетеродуплекса ДНК-РНК во время синтеза повторов теломер. Установлено, что Est3 участвует в формировании теломеразы посредством взаимодействия с Est1.