ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Исследование взаимодействий макромолекул белков с поверхностями высокодисперсных твердых тел актуально не только для лучшего понимания фундаментальных аспектов адсорбции биополимеров, но и необходимо в разработке технологических процессов в биохимии и медицине. В настоящее время большое внимание уделяется фундаментальным исследованиям взаимодействия макромолекул белков и ферментов с поверхностью твердого тела, в связи с использованием высокодисперсных кремнеземных адсорбентов в качестве носителей для иммобилизации белковых и лекарственных препаратов. В настоящем сообщении приведены результаты изучения поведения макромолекул альбумина сыворотки быка (БСА) и рибонуклеазы из бычьей поджелудочной железы (РН) на поверхности макропористого кремнеземного адсорбента - Силохрома С-80 методами адсорбции из растворов и ИК - спектроскопии. Кинетика и равновесие адсорбции водных растворов макромолекул белков Силохромом были изучены при 293 К. ИК-спектры адсорбционных систем записывались на Фурье-ИК-спектрометре Перкин-Элмер 2000 (Перкин Элмер, США). Для исследования твердых образцов применялся метод диффузного отражения с использованием приставки фирмы Перкин-Элмер, модифицированной в ИФХЭ РАН для специальных целей. Спектры растворов и осадков из растворов исследовались на пластинках из КРС-5 методом пропускания. Адсорбция макромолекул БСА и РН на гидроксилированной поверхности Силохрома С-80 приводит к исчезновению в ИК-спектре полосы 3745 см"' поглощения структурных силанольных ОН-групп кремнезема и появлению в области более низких частот полосы 3683 см"' и более широких полос поглощения ОН- и NH-групп, что указывает на образование водородных связей. Кроме того, анализ ИК-спектров адсорбированных белков в области частоты амид I, характерной для полипептидов, показал, что при иммобилизации макромолекул БСА и РН на поверхности Силохрома С-80 имеет место частичный переход конфигурации пептидной группировки белков а-спирали в более плоскую ^-структуру, т.е. происходят изменения во вторичной структуре адсорбированных белков. Изучение адсорбционным и ИК-спектроскопическим методами взаимодействия макромолекул глобулярных белков с поверхностью Силохрома С-80 показало влияние различий химического строения макромолекул белков на форму изотерм адсорбции, максимальную величину адсорбции и ИК-спектры адсорбированных белков. Обсуждены различия в форме изотерм и величинах адсорбции макромолекул глобулярных белков и ИК-спектрах адсорбированных белков при взаимодействии с поверхностью адсорбента-носителя - Силохрома С-80.