ИСТИНА

PPAR (Peroxisome proliferator-activated receptors) -- транскрипционные факторы, принадлежащие к семейству ядерных рецепторов. Эти транскрипционные факторы играют центральную роль в регуляции экспрессии генов углеводного и жирового обменов, а также регуляции воспалительного ответа. Известны три изоформы PPAR, кодируемые разными генами: ?, ?/?, ?. Они различаются по специфичности к лигандам. Один из ключевых путей регуляции активности ядерных рецепторов - это изменение уровня их экспрессии, однако работ по исследованию изменения экспрессии всех трех изоформ PPAR в одних экспериментальных условиях практически нет. Такие исследования важны, так как данные рецепторы участвуют в регуляции метаболических путей, нарушения которых приводят к развитию диабета, атеросклероза, ожирения. Также предполагается непосредственная роль этих рецепторов в модуляции воспалительного ответа. Поскольку воспалительный ответ является характерной чертой для таких заболеваний как атеросклероз, ишемия, инсульты головного мозга, нейродегенеративные заболевания, то возможность применения для их лечения уже принятых к использованию лекарственных средств привлекает исследователей. Одним из таких соединений является росиглитазон, агонист PPARg рецепторов. Его используют для лечения диабета 2 типа. Имеются многочисленные данные, что диабет - это заболевание с нарушенной системой воспалительного ответа, Однако механизм этих изменения не ясен. В данной работе на клетках линии человека HeLa проведено исследование экспрессии трех изоформ PPAR (?, ?/?, ?) и двух изоформ циклооксигеназы (СОХ-1, СОХ-2) при стимуляции липополисахаридом (ЛПС), который используется как классический стимул воспалительного ответа клеток, поскольку ЛПС активирует Толл-подобные рецепторы, которые входят в систему врожденного иммунитета. Проверена возможность модулировать эти эффекты росиглитазоном. Циклооксигеназа, ключевой фермент синтеза простагландинов, в первую очередь простагландина Е2, который является маркером воспаления. Поскольку культивирование клеток в присутствии повышенной концентрации глюкозы считается адекватной моделью процессов, происходящих на уровне организма, мы сравнили изучаемую систему при культивировании клеток с нормальной (5 мМ) и высокой (25 мМ) концентрацией глюкозы. Уровень экспрессии генов PPAR a, b, g, COX-1 и COX-2 определяли методом полуколичественного ПЦР. Показано, что инкубация клеток в среде с повышенным содержанием глюкозы уменьшает уровень экспрессии PPARa и PPARb практически в 2 раза, уменьшает уровень экспрессии СОХ-2, не влияет на уровень экспрессии PPARg и СОХ-1. Показано, что липополисахарид (ЛПС) стимулирует экспрессию СОХ-2 и всех изоформ PPAR в 1,5-2,5 раза. Культивирование клеток в условиях повышенной концентрации глюкозы нивелирует активность ЛПС по отношению к экспрессии СОХ-2 и изоформ PPAR. При такой обработке значительно падает уровень экспрессии СОХ-1. Росиглитазон, агонист PPARg, вызывает понижение уровня экспрессии PPARb и снимает эффект ЛПС. Росиглитазон снижает экспрессию обеих изоформ COX. Обработка клеток глюкозой усиливает эффекты росиглитазона. Это предполагает возможность использования росиглитазона не только как антидиабетического лекарства, но и антивоспалительного средства у больных диабетом, подвергшимся атаке различных патогенов.