ИСТИНА

Коллагеновые матрицы используются как биологические протезы клапанов сердца. Для уменьшения кальцификации применяют покрытие матриц хитозаном. Недавно предложено вводить в состав матриц наноалмазы для улучшения их механических свойств. Для подбора оптимальной методики введения наноалмазов в коллагеновую матрицу и определения влияния на связывание наноалмазов химического состава их поверхности требуется определить их содержание. В данной работе предложено для этого использовать меченные тритием наноалмазы, но для измерения их радиоактивности требуется предварительное растворение матрицы. Методика растворения коллагеновых матриц с нанесённым на них [3H]хитозаном в азотной кислоте с дальнейшим измерением радиоактивности раствора с помощью жидкостной сцинтилляционной спектрометрии была разработана ранее. В данной работе ее адаптировали для определения радиоактивности наноалмазов. В работе были использованы коллагеновые матрицы, на которые сначала были нанесены наноалмазы в их водной суспензии, а затем хитозан из растворов в угольной кислоте под давлением (бифазная система вода/субкритический диоксид углерода). Использовали наноалмазы, обладающие положительным и отрицательным электрокинетическим потенциалом в водной суспензии. Меченные тритием наноалмазы получали с помощью метода термической активации трития. Коллагеновые матрицы, содержащие в своем составе меченые наноалмазы, делили на части, высушивали на воздухе до постоянной массы с использованием нагревания до температуры не выше 50°С, помещали в стеклянный флакон, добавляли 53%-ную HNO3 (плотность 1,33 г/мл), закрывали крышкой и нагревали на протяжении от 0,5 до 2 ч. При образовании бурых паров в объеме флакона нагревание останавливали. После охлаждения флаконов до комнатной температуры их дополнительно охлаждали до -15°С в морозилке, переносили суспензию в эппендорфы и центрифугировали при 13400 об/мин на протяжении 15 минут. Затем с помощью ЖС-спектрометра RackBeta 1215 измеряли радиоактивность надсуспензионной жидкости и осадка, который ресуспендировали в сцинтилляционной жидкости OptiPhase HiSafe 3. Было найдено, что после полного растворения коллагеновой матрицы и дальнейшего нагревания в азотной кислоте в течение 2 ч разложения наноалмазов не происходит и тритий практически полностью остается в составе наноалмазов. Это наблюдение подтверждает, что с помощью метода термической активации можно получить меченые наноалмазы, в которых тритий удерживается прочно. Разработанная методика позволила определить содержание наноалмазов в коллагеновых матрицах. Обсуждается влияние типа наноалмазов на их связывание с коллагеновыми матрицами и их механическую прочность.