ИСТИНА

FACT - это многофункциональный гистоновый шаперон, участвующий в транскрипции, репликации и репарации ДНК. Было показано, что при инициации транскрипции белковый комплекс FACT модулирует доступность нуклеосомальной ДНК [1], вероятно, индуцируя разворачивание нуклеосомы in vivo. Ранее в нашей группе было продемонстрировано, что FACT способен обратимо реорганизовывать нуклеосому в присутствии HMGB-белка Nhp6 без использования энергии АТФ in vitro [2,3], однако детально механизм реорганизации остается неизученным. В настоящей работе механизм разворачивания нуклеосомы дрожжевым белковым комплексом FACT был исследован с помощью электронной микроскопии с негативным контрастированием и spFRET-микроскопии. Было показано, что комплекс FACT имеет компактную трехдоменную структуру, обладающую конформационной гибкостью, что, вероятно, играет важную роль во взаимодействии комплекса с нуклеосомами. С-концевые домены димера Spt16/Pob3 комплекса FACT важны для взаимодействия с Nhp6; кроме того, связывание белка Nhp6 с С-концевыми доменами субъединиц Spt16/Pob3 индуцирует частичное раскрытие всего комплекса. Методом электронной микроскопии было продемонстрировано, что комплекс FACT способен разворачивать нуклеосомы в практически линейную структуру. На основании полученных данных предложена новая модель реорганизации нуклеосомы белковым комплексом FACT.