ИСТИНА

Образующаяся в результате работы дыхательной цепи разность электрохимических потенциалов ионов водорода (про-тондвижущая сила, proton motive force, pmf) может рассеиваться в присутствии так называемых разобщителей окислительно-го фосфорилирования, увеличивающих протонную проницаемость внутренней мембраны митохондрий. Механизм работы этих гидрофобных соединений до конца не выяснен, и далеко не всегда действие разобщителей можно объяснить их способ-ностью обратимо связываться с ионами водорода и трансмембранно переносить их, сбрасывая pmf. В литературе обсуждает-ся альтернативная возможность, рассматривающая непосредственное взаимодействие разобщителей с белками внутренней мембраны митохондрий. Интерес к изучению механизма действия разобщителей возрос после обнаружения соединений, способных «обращать» увеличение протонной проводимости митохондриальной мембраны. К таким соединениям относится 6-кетохолестанол (КХ), введенный в практику, благодаря работам А. Старкова и его коллег в 1994 г. (FEBS Letters 355, 305–308). Это соединение широко применяется в качестве ресопрягающего агента, однако его влияние собственно на ферменты дыхательной цепи изучены недостаточно. Мы обнаружили, что КХ в диапазоне концентраций 0–50 мкМ специфически ин-гибирует NADH-оксидазную и NADH:убихинон-оксидоредуктазную активности, катализируемые комплексом I дыхатель-ной цепи субмитохондриальных частиц сердца быка (СМЧ), и не влияет на активность фермента с искусственными акцепто-рами электронов. Таким образом, действие ингибитора направлено на убихинон-связывающий центр комплекса I. Обнару-жено, что КХ более эффективно блокирует прямую реакцию комплекса I (окисление NADH убихиноном) по сравнению с pmf-зависимой реакцией обратного переноса электронов от убихинола на NAD+. Равновесные константы ингибирования КХ прямой и обратной реакций составляют 7 и 20 мкМ, соответственно. В исследованной области концентраций КХ АТРазная активность СМЧ падает примерно на 50%, а сукцинатоксидазная активность практически не изменяется. Полученные дан-ные указывают на то, что ресопрягающее действие КХ может осуществляться с участием комплекса I дыхательной цепи. Ранее считалось, что КХ влияет на физико-химические параметры липидной части внутренней мембраны митохондрий, та-кие как дипольный потенциал и микровязкость.