ИСТИНА

Оксидаза D-аминокислот (DAAO) – это фермент, катализирующий реакцию окисления D аминокислот до соответствующих α-кетокислот с образованием пероксида водорода и иона аммония. Этот фермент играет важную физиологическую роль, а так же широко применяется в биотехнологии. Одной из областей применения DAAO является ее использование в производстве полусинтетических цефалоспоринов различных поколений. DAAO применяют в биокаталитическом процессе окисления цефалоспорина С до 7 аминоцефалоспорановой кислоты – исходного соединения для производства цефалоспориновых антибиотиков различных полоклений. DAAO из дрожжей Trigonopsis variabilis (TvDAAO) является наиболее перспективным ферментом для использования в промышленной биотехнологии, так как обладает наилучшими каталитическими свойствами с цефалоспорином С. Для исследования связи структуры и функций фермента, определения и улучшения его каталитических свойств в нашей лаборатории проводят эксперименты по получению мутантных TvDAAO и изучению их каталитических параметров. В нашей лаборатории были получены мутантные формы фермента с заменами лейцина в 38-м положении с целью изучения кислородного канала TvDAAO. В данной работе было проведено изучение каталитических параметров мутантных TvDAAO в реакции окисления цефалоспорина С, с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии. Были получены значения каталитической константы и константы Михаэлиса для мутантных форм TvDAAO, было проведено сравнение с соответствующими параметрами для TvDAAO дикого типа.