ИСТИНА

Введение: Конструирование персонализированной терапевтической вакцины на основе неоантигенов опухоли - одно из новых и эффективных направлений в иммунотерапии злокачественных новообразований. Мы исследовали иммуногенность и протективные свойства профилактической неоантигенной вакцины на основе рекомбинантного аденовирусного вектора, кодирующего Kif18B (K739N) - уникальный мутационный неоантиген меланомы B16F10. Вакцину Ad-B16F10 использовали с молекулярным TLR4-адъювантом «Иммуномакс». Материалы и методы: Вакцинный препарат Ad-B16F10 представляет собой рекомбинантный нереплицирующийся вектор на основе аденовируса человека 5 типа со вставкой экспрессионной кассеты ДНК, кодирующей мутацию в гене Kif18B (K739N). Ad-B16F10 был изготовлен в коллективе М.М. Шмарова (НИЦЭМ им. Н. Ф. Гамалеи). Вакцину в дозе 108 БОЕ в комплексе с адъювантом дважды вводили внутримышечно мышам С57Bl/6. После второй иммунизации мышам инокулировали 200 тыс. клеток меланомы B16F10. Антиген-реактивные CD4 и CD8 Т клетки, секретиующие IFN-γ, анализировали методом ELISPOT. Уровень антител к неаонтигену Kif18B (K739N) и антигенам меланомы B16F10 в сыворотке крови иммунизированных мышей измеряли методом ИФА. Результаты: Двукратная вакцинация аденовирусным вектором Ad-B16F10, кодирующим неоантиген меланомы B16F10, в сочетании с агонистом TLR4 эффективно индуцировала генерацию значительного количества противоопухолевых CD4 T клеток и CD8 T клеток (0.5% от клеток селезенки). В крови иммунизированных мышей обнаруживали антитела (титр 1/100000), специфичные к целевому антигену Kif18B (K739N). Индуцированные аденовирусной вакциной противоопухолевыее Т-клеточные и гуморальные реакции сопровождались заметным ингибированием возникновения и прогрессии опухоли B16F10. Так, у 50% мышей, иммунизированных Ad-B16F10 с агонистом TLR4, опухоли не возникли совсем, и еще у 33% мышей возникшие опухоли были в 10-20 раз меньшего размера, чем в контроле (без иммунизации). Заключение: Исследование показало высокую иммуногенность и протективные свойства Ad-B16F10 вакцины, кодирующей неоантигеный эпитоп Kif18B (K739N) меланомы B16F10.