ИСТИНА

Гидрофильная хроматография (ГИХ) – современный высокоэффективный метод, позволяющий проводить определение как нейтральных, так и заряженных полярных соединений и обладающий альтернативной селективностью по отношению к методам обращенно-фазовой и ионной хроматографии. Метод успешно применяют для разделения широкого спектра веществ без необходимости предварительной дериватизации, что является неоспоримым преимуществом, однако, нередко ставит сложные задачи, требующие создания и характеризации новых неподвижных фаз. В настоящее время в ГИХ используют гидрофильные сорбенты с различными по природе функциональными группами, получаемыми преимущественно модифицированием силикагеля. Цвиттер-ионные неподвижные фазы являются почти универсальными, обеспечивая разделение многих полярных веществ в режиме ГИХ как за счет электростатических взаимодействий с заряженными функциональными группами и адсорбции, так и за счет распределения в приповерхностном водном слое. Ковалентное закрепление цвиттер- ионных слоев на поверхности матриц является оптимальным, поскольку обеспечивает стабильность привитых групп в потоке элюента с высоким содержанием органической фазы, характерным для гидрофильного режима. В литературе отмечено, что сорбенты с разветвлённой структурой обладают повышенной селективностью и эффективностью. Кроме того, увеличение количества слоев спейсера улучшает экранирование матрицы на основе силикагеля, препятствуя влиянию силанольных групп на удерживание, что особенно важно для заряженных аналитов. Наиболее популярный способ получения таких сорбентов заключается в последовательном наращивании функционального слоя, что позволяет варьировать селективность фаз, изменяя природу функциональной группы и спейсера, а также число циклов модифицирования. Установление влияния степени разветвленности структуры сорбентов на их хроматографические свойства представляет актуальную задачу и являлось целью данной работы. В работе синтезированы 3 сорбента на основе 3-аминопропилсиликагеля путем последовательного закрепления 1,4-бутандиолдиглицидилового эфира (1,4-БДДГЭ) в качестве спейсера (сорбент С-Б), раскрытием оксиранового кольца с помощью цвиттер- ионного глицина (сорбент Б-Г) и формированием второго слоя спейсера (сорбент Б-Г-Б). Оценку и сравнение хроматографических параметров сорбентов осуществляли с использованием теста Танака для гидрофильных фаз и модельных смесей полярных аналитов: азотистых оснований и нуклеозидов, сахаров, витаминов, аминокислот. Результаты теста Танака показали увеличение гидрофильности (параметр kU) при переходе от сорбента С-Б (kU = 1.3) к сорбенту Б-Г (kU = 1.54), модифицированному глицином, и её уменьшение при дальнейшем закреплении 1,4-БДДГЭ для сорбента Б-Г- Б (kU = 1.41). Для всех трех сорбентов наблюдали высокую анионообменную селективность. На сорбентах С-Б и Б-Г возможно разделить модельную смесь из 10 азотистых оснований и нуклеозидов за 11 минут. Меньшая селективность сорбента Б-Г-Б позволяет разделить при тех же условиях только 7 соединений. Эффективность по сахарам, азотистым основаниям и нуклеозидам согласовалась с гидрофильностью сорбентов и составила 10000 тт/м и 25000 тт/м соответственно для наиболее гидрофильного Б-Г.