ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
|
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Адаптация современных высокотехнологичных методов диагностики к условиям клинических лабораторий является важной задачей научных центров для повышения качества и доступности медицинских услуг. В последние годы возрос интерес зарубежных и российских ученых к фенольным метаболитам микробного происхождения. Показано, что их содержание в сыворотке крови больных существенно повышается в критических состояниях, при бактериальной интоксикации, сепсисе и других заболеваниях, что может быть использовано для диагностики и мониторинга эффективности терапии. Известные в настоящее время методики определения фенилкарбоновых кислот (ФКК) в крови с использованием газовой хромато-масс-спектрометрии дороги и малодоступны. Для определения ФКК на газовом хроматографе нами модифицирована пробоподготовка и оптимизированы режимы ГХ анализа. В настоящей работе проведено сравнение результатов определения фоновых концентраций ФКК в сыворотке крови, с использованием газовой хроматографии с масс-спектральным (ГХ-МС) и пламенно-ионизационным (ГХ-ПИД) детектированием продуктов. Исследованы образцы сыворотки венозной крови здоровых добровольцев. Пробоподготовка в обоих случаях включала разбавление исходной сыворотки, введение внутреннего стандарта, подкисление, экстракцию эфиром, упаривание, дериватизацию с получением триметилсилильных производных. Эффективность экстракции веществ в органическую фазу повышается за счет высаливания, поэтому начальная методика была модифицирована добавлением этой процедуры с последующим определением ФКК методом ГХ-ПИД. Определяли следующие диагностически-значимые ФКК: бензойную (БК), фенилпропионовую (ФПК), фенилмолочную (ФМК), пара-гидроксифенилмолочную (п-ГФМК), фенилуксусную (ФУК) и пара-гидроксифенилуксусную кислоту (п-ГФУК). Показано, что методика ГХ-ПИД в сочетании с модифицированной пробоподготовкой является эффективной и вполне доступной альтернативой ГХ-МС.