ИСТИНА

Явление клеточного каннибализма (КК) описано в литературе, однако пристальный интерес исследователей привлекло только в последнее время. Одним из вариантов КК является энтоз. В случае энтоза одна трансформированная эпителиальная клетка ошаривается и активно внедряется в распластанную клетку. В дальнейшем такая клетка, как правило, подвергается лизосомопосредованной деградации. Однако в некоторых случаях поглощенная клетка может вступать в митотическое деление и даже покидать поглотившую ее клетку. В основе механизма внедрения лежит работа актомиозиновой системы, регуляция осуществляется сигнальным каскадом Rho-ROCK. Однако основные механизмы внедрения и дальнейшая судьба клеток неясны. Целью данного исследования является определение способности к каннибализму клеток-каннибалов и внедрившихся клеток к продвижению по клеточному циклу. В клетках культуры А431 (эпидермоидная карцинома человека). Каннибалический индекс составляет 0.9±0.6%. Анализ препаратов, окрашенных гематоксилином и эозином, показал, что встречаются всевозможные фенотипы клеток-каннибалов – как гетерофазные (каннибал в интерфазе, поглощенная клетка в митозе, и наоборот), так и гомофазные (интерфазные и митотические). Импульсное включение предшественника синтеза ДНК BrdU также позволило выявить в культуре клеток А431 гомо- и гетерофазные энтозы (гомофазные немеченные и меченные энтозы, гетерофазные энтозы – меченная клетка-каннибал, меченная поглощенная клетка). Таким образом, и клетки-каннибалы, и поглощенные клетки способны вступать в митоз и синтезировать ДНК в процессе клеточного каннибализма. При этом митотические клетки чаще встречаются среди поглощенных клеток, а индекс мечения клеток-каннибалов несколько превышает индекс мечения популяции. Оба этих факта могут свидетельствовать о замедлении прохождения этих фаз клеточного цикла. Остановка клеточного цикла на границе G1 и S-фазы воздействием гидроксимочевины (4 мМ) не влияет на КК. Так как в процессе деградации поглощенной клетки происходит постепенное закисление каннибалической вакуоли, было проведено окрашивание лизосомного компартмента. Слабое закисление каннибалической вакуоли на начальных этапах КК не препятствует прохождению S- и M-фаз клеточного цикла. На этой стадии клетка-каннибал и поглощенная клетка соединены адгезивными контактами. Нарушение межклеточных контактов совпадает с активацией лизосом поглощенной клетки и клетки-каннибала. На последних этапах деградации каннибалическая вакуоль не окрашивается pH-зависимыми лизосомными красителями. В целом, полученные нами данные свидетельствуют о том, что как клетка-каннибал, так и поглощенная клетка способны продвигаться по клеточному циклу (S-фаза и митоз) в процессе энтоза. Вероятно, при энтозе время прохождения фаз увеличивается. Поглощенная клетка способна к продвижению по клеточному циклу ограниченное время. Можно предположить, что нарушение поступления питательных веществ в поглощенную клетку активирует в ней лизосомный компартмент, что в свою очередь ведет к нарушению межклеточных контактов. Клетка-каннибал также участвует в закислении каннибалической вакуоли, что и приводит к лизосомной деградации поглощенной клетки. Работа выполнена при финансовой поддержке Российского фонда фундаментальных исследований (проект 11-04-01518-а).