![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Количество АТФ и скорость продукции АТФ митохондриями человека снижаются в присутствии пептида Aβ(1-42), который, как известно, вовлечён в патогенез болезни Альцгеймера. 1-я экспериментальная группа клеток линии нейробластомы человека SH-SY5Y культивировалась в течение 24 ч в присутствии 200 нМ пептида Aβ мономеризованного по стандартной методике (Jao, 1997; Džinić, 2018), 2-я группа клеток (контрольная) не содержала каких-либо добавок, 3-я группа содержала 0,1% ДМСО (это количество ДМСО добавляли к 1-й группе с Аβ), а 4-ая и 5-ая кроме Аβ сожержала и D-пептиды взаимодействующие с различными формами Aβ и его предшественниками (Bocharov et al., 2021; Van Groen et al., 2008) одно из которых прошло вторую фазу клинических испытаний (Mathew, 2023). После культивирования клеток митохондрии выделяли по стандартной методике (Martin, 1998; Daum, 1982). К изолированным митохондриям добавляли субстраты комплексов I, II и IV и соответствующие ингибиторы комплексов OxPhos - в отдельных экспериментах, чтобы сфокусироваться на изучении изменения активности каждого комплекса, индуцированных Aβ и другими веществами. Непосредственно перед измерениями люминесценции к митохондриям добавляли АДФ и люциферазу с люциферином (Lomakina, 2022). Для каждой экспериментальной группы строили график люминесценции (RLU) в зависимости от времени. Сравнивали максимальные значения первых производных левых частей полученных колоколообразных кривых (скорость продукции АТФ). Также сравнивали высоты пиков (соответствовали количеству произведённого митохондриями АТФ). Присутствие ДМСО приводило к незначительному снижению количества и скорости продукции АТФ митохондриями человека по сравнению с контрольной группой. Культивирование клеток с Aβ приводит к уменьшению синтеза АТФ митохондриями и к падению скорости синтеза вдвое, когда как присутсвие D-пептидов восстанавливает эти показатели до контрольных значений
№ | Имя | Описание | Имя файла | Размер | Добавлен |
---|