ИСТИНА

Эффективная и недеструктивная иммобилизация ферментов на сенсорных поверхностях является одной из важнейших задач при конструировании биосенсоров. Во многих случаях подобную иммобилизацию биомолекул можно реализовать, используя для модификации сенсорной поверхности полимеры, где полимер, формирующий на ней покрытие, играет роль «клея», который прочно удерживает ферменты на сенсорной поверхности. Сополимерные микрогели, проявляющие двойную рН- и термочувствительность, представляют собой значительный интерес. Они способны эффективно адсорбироваться на (сенсорных) поверхностях различной природы, а их частицы являются высокоемкими контейнерами для ферментов, обеспечивая связанным биомолекулам благоприятное (обогащенное водой) микроокружение. Вплоть до настоящего времени микрогель-ферментные пленки на сенсорной поверхности формировали путем последовательной адсорбции сначала полимерного, а затем биокомпонента. В данной работе рассмотрен новый подход, который заключается в том, что сначала в водном растворе получают микрогель-ферментный комплекс, а затем осуществляют его адсорбцию на сенсорную поверхность. В качестве микрогеля использовали катионный микрогель, представляющий собой сшитый сополимер N-изопропилакриламида и диметиламинопропилметакриламида, содержащий примерно 9.2 % (мольн.) диметиламинопропилметакриламидных звеньев. Глюкозооксидазу (pI 4.2) выбрали в качестве модельного фермента. Микрогель-ферментный комплекс получали при pH 7, то есть в условиях, когда полимерный компонент и биокомпонент противоположно заряжены. Связывание глюкозооксидазы микрогелем в растворе было подтверждено методом лазерного микроэлектрофореза, а основные закономерности адсорбции полученных микрогель-ферментных комплексов были исследованы методом пьезоэлектрического микровзвешивания с мониторингом диссипации. Амперометрические глюкозные биосенсоры с высокой чувствительностью и хорошей операционной стабильностью были получены путем адсорбции предварительно сформированных микрогель-ферментных комплексов на поверхность планарных графитовых электродов, модифицированных наночастицами диоксида марганца. (с. 118)