ИСТИНА

Тест-системы на основе живых прокариотических и эукариотических клеток, продуцирующих термостабильную люциферазу светляков, могут быть использованы для изучения внешних стимулов. Это незаменимый инструмент для проведения быстрого скрининга лекарственных средств, изучения эффективности и механизма их действия, поиска эффективных композиций и создания лекарственных форм. Два биолюминесцентных внутриклеточных индикатора – динамический низкомолекулярный АТР, мгновенно реагирующий на внешние воздействия, и высокомолекулярная термостабильная люцифераза светляка использованы для изучения клеточного ответа, мониторинга клеточного гомеостаза и молекулярных изменений во времени. Показана высокая информативность индикаторов для изучения механизмов адаптации, выживания и гибели клеток в присутствии внешних эффекторов физико-химической природы (температура, лекарственные препараты, мембраноактивные соединения и др.) на живых клетках (прокариотах и эукариотах). Использование биолюминесцентных клеток позволяет изучать кинетику изменения содержания АТР и люциферазы внутри и вне клеток и регистрировать начальные стадии изменения проницаемости клеточной мембраны, оценивать степень повреждения клеток, влияние стрессоров на систему синтеза/гидролиза АТР, функционирование клеточных органелл и пр. Приведены примеры количественного определения живых клеток, в том числе некультивируемых и медленнорастущих, по содержанию внутриклеточного АТР; специфическому выявлению патогенов методом биолюминесцентного иммуноанализа; оценки эффективности м механизма действия антибиотиков разных классов и их композиций с матрицами неорганической природы на живые клетки. Работа выполнена в рамках госзадания МГУ – номер ЦИТИС: 121041500039-8.