ИСТИНА

Ферритин - белковый комплекс, который состоит из 24 субъединиц, самоорганизующихся в сферообразную структуру. Ферритин является основным белком, запасающим железо и сохраняющим его в нетоксичной форме как у прокариот, так и у эукариот. При низких значениях рН ферритиновый комплекс способен обратимо разбираться, благодаря чему его можно "нагружать" низкомолекулярными веществами, например, лекарственными препаратами или флуорофорами. В настоящей работе была получена гибридная конструкция на основе ферритина, несущего на N-конце искусственный белок DARPin 9_29 для нацеливания к раковым клеткам, гиперэкспрессирующим онкомаркер Her2/ neu. Была получена генно-инженерная конструкция, кодирующая в одной рамке считывания DARPin 9_29 и ферритин человека FTL (Ferritin light chain). В качестве линкера между DARPin 9_29 и FTL использовали последовательность, содержащую остатки Ser и Gly, а также шесть остатков His для дальнейшего выделения белка с помощью металл-хелатной хроматографии. Целевой белок нарабатывали в E.coli, затем выделяли и очищали с использование Ni-NTA агарозы. Очищенный белок был помечен флуоресцентным красителем AlexaFluor488 и протестирован на культуре раковых клеток SK-BR-3, гиперэкспрессирующих рецептор HER2/neu, а также на контрольных культурах с нормальной экспрессией рецептора HER2/ neu. Показано, что полученную конструкцию на основе ферритина и DARPin 9_29 можно использовать для адресной доставки к раковым клеткам, гиперэкспрессирующим онкомаркер HER2/neu.