ИСТИНА

Глаукома представляет собой нейроофтальмологическую патологию с комплексным патогенезом. Следствием хронической внутриглазной гипертензии при глаукоме является повреждение зрительного нерва и гибель ганглиозных нейронов сетчатки. Исследования на животных показали, что медиатором повреждения ГНС могут быть ионы “мобильного” цинка, секретируемые интернейронами сетчатки. Настоящая работа посвящена исследованию цинк-опосредованных механизмов глаукомной нейродегенерации на модели клеток ретинобластомы Y79. Методом проточной цитометрии охарактеризованы динамика и механизм цитотоксических эффектов цинка в отношении клеток Y79 . С помощью цинк-аффинной хроматографии в экстрактах сетчаток выявлены потенциальные цинксвязывающие белки, которые идентифицированы методом МАЛДИ-МС. Одним из них является ретинальдегидрогеназа ALDH1A1 - сигнальный белок, который участвует в регуляции экспрессии генов, активируя каскад ретиноевой кислоты. По данным ммуноблотинга содержание ALDH1A1 в клетках Y79 увеличивается при воздействии на них цинком. При этом подавление экспрессии этого фермента с помощью РНК интерференции способствует выживаемости Y79 в этих условиях. Методом ВЭЖХ-МС обнаружено, что в присутствии цинка снижается внутриклеточная концентрация ретиноевой кислоты, что свидетельствует об ингибирующем эффекте цинка в отношении активности ALDH1A1, сопровождающимся ростом экспрессии фермента. Транскриптомный анализ клеток Y79 на фоне инкубации с цинком выявил активацию экспрессии цинковых каналов и белков-шаперонов, ингибирование синтеза факторов транскрипции, отвечающих за продукцию нейротропных белков, а также активацию синтеза компонентов фактора АР-1 и других белков, опосредующих апоптоз. Высказано предположение, что чувствительность ГНС к цитотоксическому действию цинка может быть связана с функционированием каскада ретиноевой кислоты, а ALDH1A1 может стать перспективной мишенью для терапии глаукомы.