ИСТИНА

Развитие методов молекулярной биологии открывает новые уровни регуляции экспрессии генов. Ранее считалось, что в эукариотических клетках одна мРНК кодирует только один белок. Однако последние данные показывают, что помимо основной открытой рамки считывания (ОРС) мРНК может содержать дополнительные, кодирующие функциональные пептиды или выполняющие регуляторную роль ОРС. Анализ общедоступных данных рибосомного профилирования свидетельствует о трансляции ОРС в 5’-НТО (нетранслируемой области) мРНК гена DUSP4 человека. DUSP4 — это щелочная фосфатаза двойной специфичности, связанная со множеством процессов в клетке, в том числе с процессом эпителиально-мезенхимального перехода (ЭМП). В 5’-НТО гена DUSP4 человека были обнаружены 2 малые ОРС длиной 29 и 2 кодона (далее ОРС a и b). Для исследования влияния малой ОРС а на процесс ЭМП были получены моноклональные линии клеток А549, содержащие сдвиг на 1 и 2 нуклеотида в ОРС а. В этих клетках снижена экспрессия маркера ЭМП виментина, а сами клетки данных линий обладают меньшей подвижностью в условиях индукции ЭМП TGF-b1, то есть имеют более эпителиальный фенотип. Экзогенное тагирование малых ОРС подтвердило, что эти участки мРНК DUSP4 могут транслироваться. Было показано, что ОРС а кодирует микропептид, суперэкспрессия которого приводит к увеличению экспрессии маркера ЭМП виментина в клетках А549. Исследование влияния ОРС a и b на трансляцию нижележащей рамки считывания с помощью двойных люциферазных репортёров показало небольшое увеличение трансляции основной рамки считывания при замене старт-кодонов ОРС а и b на неинициирующие кодоны. Такой же эффект был продемонстрирован в условиях индукции ЭМП. Таким образом, наши данные показывают, что ОРС а способствует процессу ЭМП. Механизм регуляции ЭМП малыми ОРС а и b требует дальнейшего исследования.