ИСТИНА

Введение. На сегодняшний день диагностика протоковой аденокарциномы поджелудочной железы (ПАПЖ) основана на использовании инвазивных методов, сопряженных с возникновением жизнеугрожающих состояний. Жидкостная биопсия является перспективным подходом, позволяющим неинвазивно диагностировать это заболевание. Оптимальным способом диагностики является анализ внеклеточной опухолевой ДНК (воДНК), содержащей мутации 12, 13 или 61 кодонов гена KRAS, с помощью цифровой капельной ПЦР (цкПЦР). Плазма является наиболее часто используемым субстратом для жидкостной биопсии, однако желчь содержит большее количество воДНК. Кроме того, она рутинно собирается у пациентов с нарушениями оттока этой биологической жидкости, требующими дренирования желчных путей, что зачастую является первым клиническим проявлением ПАПЖ. Цель исследования. Оценка диагностической и прогностической способностей жидкостной биопсии плазмы и желчи с анализом воДНК у пациентов с новообразованиями поджелудочной железы. Материалы и методы. В исследовании принимали участие 38 здоровых добровольцев, 95 больных с первичной ПАПЖ (у 20 из них были собраны образцы желчи) и 18 пациентов с другими новообразованиями поджелудочной железы (ДНПЖ), такими как внутрипротоковая папиллярная муцинозная карцинома, солидная псевдопапиллярная неоплазия, серозная цистаденома и так далее. Выделение ДНК происходило из 5 мл плазмы и желчи. Для выявления воДНК с помощью цкПЦР проводился анализ 12 наиболее распространенных драйверных мутаций 12, 13 и 61 кодонов гена мутаций KRAS. Результаты. По результатам анализа плазмы воДНК обнаружена у 61% пациентов с ПАПЖ (концентрация 5,08 [0; 17,55] копий/мл), у 1 из 18 пациентов с ДНПЖ (концентрация 2,34 копий/мл) и не была обнаружена у здоровых добровольцев. В то же время при анализе 20 парных образцов желчи и плазмы воДНК была выявлена в 18 образцах желчи и лишь в 11 образцах плазмы. Содержание воДНК в желчи было значительно выше, по сравнению с таковым в плазме (248,6 [6,743; 1068] копий/мкл против 3,26 [0; 19,225] копий/мкл р=0,001). Таким образом, чувствительность и специфичность цкПЦР в дифференцировке пациентов с ПАПЖ по отношению к группе контроля составили 61% и 100% соответственно, а по отношению к группе с ДНПЖ – 61% и 94% соответственно. В результате исследования была обнаружена слабая корреляция между концентрациями в плазме воДНК и онкомаркера СА19-9 (rs (коэффициент корреляции Спирмена)=0,302, p=0,003), а также ассоциацией воДНК в плазме с размером опухоли (р<0,05) и наличием отдаленных метастазов (р=0,01). Было показано, что общая выживаемость ниже у пациентов с наличием мутаций KRAS в плазме (отношение рисков 2,2 (95% ДИ (доверительный интервал): 1,1–4,4), р=0,024) или уровнем общей воДНК в плазме, превышающим 4,735 копий/мкл (отношение рисков 2,4 (95% ДИ: 1,3-4,6), р=0,005). Выводы. Жидкостная биопсия плазмы и желчи – перспективный инструмент для диагностики и прогнозирования течения ПАПЖ.