ИСТИНА

Введение: В настоящее время актуальной проблемой регенеративной медицины остается проблема восстановления или замещения поврежденной ткани мочевого пузыря (МП). Одним из направлений наших исследований является изучение возможности и эффективности использования методов клеточной терапии в комплексном лечении социально опасных заболеваний, в частности туберкулеза (ТБ), который поражает любые органы и ткани человека. Mycobacterium tuberculosis инфицирует человека воздушно-капельным путем и затем распространяется на другие органы. ТБ мочеполовой системы – вторая по распространенности форма внелегочного ТБ. МП вовлекается в патологический процесс и в его стенке формируются туберкулезные узелки (гранулемы), которые затем сливаются между собой, образуя многочисленные язвы. Язвы распространяются на мышечный слой стенки МП, происходит повреждение и разрушение мышечных волокон с формированием фиброза. При этом происходит деформация МП, уменьшение его объема (микроцистит), в результате формируется контрактура (склероз) МП. Стоит отметить, что эта локализация заболевания очень плохо поддается стандартным методам этиопатогенетического лечения и излечение возможно только на ранних стадиях заболевания. Клинические исследования демонстрируют способность МСК к восстановлению различных тканей [1-3]. Было показано, что при идиопатическом легочном фиброзе использование МСК корректирует эпителиально-мезенхимальное взаимодействие [4] и снижает степень фиброза ткани путем секреции различных гуморальных факторов [5-7]. Целью работы было исследование эффективности применения клеточной терапии для профилактики туберкулезного сморщивания МП кролика. Материалы и методы: Для данных исследований была разработана экспериментальная модель осложненного течения туберкулезного поражения МП кролика. Создание модели туберкулезного поражения МП производили методом инокуляции культуры микобактерий под слизистую оболочку МП, контроль развития туберкулезного процесса осуществляли с помощью аллергической кожной реакции аллергеном туберкулезным рекомбинантным («Диаскинтест»). Также оценивались бактериологические, рентгенологические показатели, в ряде случаев производили диагностическую лапаротомию с забором биоптатов для гистологического исследования. Для проведения клеточной терапии были использованы аллогенные мезехимальные стромальные клетки (МСК) костного мозга кролика. Введение в состав клетки прижизненной метки – суперпарамагнитных наночастиц оксида железа позволило в дальнейшем выявить локализацию клеток и оценить возможность их дифференцировки в ткани МП. Экспериментальные животные были разделены в случайном порядке на четыре группы: 1 – животные с развившейся моделью туберкулезного поражения МП, которым проводилась стандартная противотуберкулезная терапия, дополненная введением МСК; 2 – животные, которым проводилась стандартная противотуберкулезная терапия; 3 – животные, которым лечение не проводилось (контроль заражения); 4 – интактные животные (контроль). Клеточная терапия осуществлялась путем инъецирования суспензии МСК в подслизистый слой МП. Оценка результатов лечения производилась через 2 месяца после введения МСК. Обсуждение результатов: При выведении животных из эксперимента отмечена существенная разница в визуальной оценке состояния стенки МП. У животных, которым применяли комплексную терапию с введением МСК (1 группа) отмечалось макроскопическое сходство стенки МП со стенкой МП интактного кролика. В то время как у животных, которым проводилась стандартная этиотропная терапия, обнаруживаются признаки продолжающегося воспалительного процесса. В группе контроля заражения наблюдали грубые рубцово-воспалительные изменения в стенке МП. При гистологическом исследовании препаратов получено подтверждение эффективности комбинированного лечения в виде меньшей выраженности признаков воспаления по сравнению с контрольными группами. Клетки, помеченные наночастицами, были обнаружены в эпителиальном и мышечном слоях МП. Иммуногистохимические исследования показали, что клетки, содержащие наночастицы, взаимодействовали с антителами против цитокератина – одного из специфических маркеров уротелия. Таким образом, можно предполагать, что клетки, инъецированные в подслизистый слой, мигрируют в разные слои МП и могут частично дифференцироваться в клетки уротелия. Показано, что дифференцировка МСК в данном направлении возможна, однако данные, существующие в настоящее время весьма противоречивы. Заключение: Было показано, что применение клеточной терапии ограничивает развитие рубцово-спаечного процесса, оказывает положительное влияние на репарационные процессы в тканях МП и способствует профилактике туберкулезного сморщивания МП. Работа выполнена при финансовой поддержке Гранта РНФ № 14-50-00068.