ИСТИНА

Целью данной работы является разработка методики капсулирования гемоглобина в полиэлектролитных микрокапсулах, c сохранением его химических свойств, для применения в качестве газотранспортной системы человека. Такой метод в перспективе позволит отказаться от донорской крови и сделает процедуру гемотрансфузии гораздо более доступной. Кровезаменитель выполнен в виде ансамбля полиэлектролитных микрокапсул (ПЭ-микрокапсул) с включенным в них гемоглобином, оболочки которых состоят из чередующихся слоев поликатиона и полианиона. Нашей первостепенной задачей являлось исследования функционального состояния гемоглобина в присутствии полиэлектролитов: полиаллиламина (ПАА), полистароссульфоната (ПСС) и декстрансульфата (ДС). Функциональное состояние гемоглобина определяли по изменению окружения гема, наблюдаемое по изменению спектра в полосе Соре. Структуру белка смотрели методами собственной флуоресценции белка и методом кругового дихроизма. Показано, что ПСС полностью ингибирует гемоглобин, разрушая его третичную структуру, при этом a-спиральная структура сохраняется. В то время как ПАА и ДС не влияют на структуру и функциональные свойства белка. Кроме того нами изучено влияние pH среды, в диапазоне от 4 до 9, на структуру гемоглобина. Необходимость этого была обусловлена спецификой методов приготовления капсул. Из данных полученных при измерении оптической плотности раствора гемоглобина в полосе Соре видно, что оптимальное значение pH для гемоглобина находится в значении 7. Подкисление раствора до 4 или подщелачивание до 8 приводит к нарушению свойств белка, однако данный процесс обратим, после доведения раствора до pH 7, происходит возвращение показаний оптической плотности до первоначальных. Данное обстоятельство позволяет говорить о возможности включения гемоглобина в полиэлектролитные микрокапсулы без потерь их функциональных свойств. На основе полученных данных, нами отработана методика капсулирования гемоглобина в полиэлектролитные микрокапсулы, сформированные из трех типов полиэлектролитов ПСС, ПАА, ДС и имеющих формулу (ПАА/ДС)3ПСС. Начато изучение газотранспортных свойств инкапсулированного гемоглобина.