ИСТИНА

Один из подходов к изучению ионных механизмов регуляции фотосинтеза основан на внутриклеточной перфузии одиночных междоузлий харовой водоросли. Перфузия клетки растворами с добавлением ЭГТА сопровождается разрушением тонопласта, что позволяет замещать цитоплазму искусственным раствором с заданным ионным составом. Это дает возможность исследовать влияние ионного состава цитоплазмы на фотохимическую активность фотосистемы II (ФСII) по флуоресцентным характеристикам хлоропластов, измеряемых методом насыщающих световых импульсов на микроучастках растительной клетки. Один из механизмов нефотохимического тушения в возбудимой растительной клетке предположительно связан с фотоиндуцированным накоплением ионов Са2+ в строме хлоропластов. По данным литературы Ca2+ поступает в строму на свету посредством электрогенного унипорта; при этом поступление Ca2+ нечувствительно к блокаторам Ca-каналов, но чувствительно к валиномицину. Валиномицин препятствует фотоиндуцированному поступлению Ca2+ в строму за счет повышения K+- проводимости мембран и устранения разности электрических потенциалов на внутренней мембране оболочки хлоропласта. В данной работе с помощью модельной системы «перфузируемая» клетка водоросли Chara corallina было изучено влияния различных концентраций Са2+ на параметры флуоресценции, а также влияние валиномицина на Са2+-зависимое тушение флуоресценции на свету. Достоверные зависимости от уровня концентрации Са2+ в цитоплазме удалось получить для квантового выхода фотопереноса в ФС II. В темноте квантовый выход ФСII не зависит от концентрации Са2+, а на свету при увеличении [Ca2+] происходит снижение квантового выхода ФСII и, соответственно, скорости нециклического транспорта электронов. Присутствие валиномицина в перфузионной среде приводило сначала к ослаблению нефотохимического тушения, обусловленного высокими [Са2+]цит, а затем и полному его исчезновению. Это говорит о том, что энергозависимое тушение флуоресценции определяется не только градиентом Н+ на тилакоидной мембране, но зависит и от других факторов, в частности от повышения уровня [Ca2+] в строме хлоропластов. Таким образом, можно заключить что изменения концентраций Са2+ в цитоплазме могут играть существенную регуляторную роль в жизнедеятельности растительной клетки.