![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Представителями рода Mycoplasma (класс Mollicutes) являются Грамположительные бактерии без клеточной стенки. Обусловленная паразитическим образом жизни значительная редукция генома (0,58–2,20 Mb) и, соответственно, редукция всех молекулярных систем клетки, но сохраненная способность микоплазм расти на искусственной питательной среде, делает эти организмы очень удобным модельным объектом для исследований в области системной биологии. Несмотря на значительную редукцию генома, и как следствие – потерю многих метаболических генов и их продуктов, адаптивные способности микоплазм остаются достаточными, чтобы в условиях in vivo и in vitro приспосабливаться к воздействию антибиотиков, теплового и осмотического стрессов, уклоняться от действия иммунной системы хозяина. Однако механизмы патогенности и адаптации этих бактерий очень плохо изучены. В данной работе впервые было проведено исследование внутриклеточной инфекции Mycoplasma gallisepticum на примере заражения трех клеточных культур, принадлежащим к разным хозяевам, а именно куриных эритробластов (линия HD3), мышиных эмбриональных стволовых mES клеток и клеток HeLa (линия раковой опухоли шейки матки человека). С помощью методов двумерного дифференциального электрофореза и MRM (Multiple Reaction Monitoring) подхода обнаружено явление протеомного «фазового перехода», которое претерпевает M. gallisepticum при инвазии в эукариотические клетки и которое остается стабильным при последующей изоляции бактерии из клеток- хозяев и длительном культивировании на питательной среде в лабораторных условиях, что может свидетельствовать о нали- чии бактериальной клеточной памяти. Найдены узловые регуляторы (YebC/PmpR и SpxA) фазовых состояний. Обнаружено, что изменения протеома M. gallisepticum являются универсальными для всех исследуемых клеточных линий, несмотря на различия в структуре и организации клеток-хозяев. Идентифицированы основные группы белков, представленность которых меняется в результате внутриклеточной инфекции. На моделях острой и хронической инфекции показано, что паттерн белковых изменений в большой степени зависит от длительности взаимодействия M. gallisepticum с эукариотической клеткой. Работа поддержана грантом РНФ № 14-24-00159 «Системное исследование минимальной клетки на модели Mycoplasma gallisepticum».