ИСТИНА

Дипептидилпептидаза 4 (ДПП 4), принадлежащая к семейству S9 сериновых пептидаз, играет ключевую роль в различных регуляторных процессах у человека и животных. Нами недавно была найдена секретируемая ДПП 4 насекомых семейства Tenebrionidae, кардинально отличающаяся по своей биологической функции от хорошо изученных регуляторных пептидаз млекопитающих. Эта пептидаза является доминирующим и наиболее активным пищеварительным ферментом в спектре ПСП у этих организмов, принимая участие не в регуляции, а в эффективной деградации пролинсодержащих белков и пептидов, являющихся основным пищевым субстратом данного вида насекомых. Для дифференциальной оценки ферментативной активности ДПП 4, входящей в состав сложного ферментного комплекса ПСП различных типов, актуальным является дизайн, разработка методов синтеза и изучение ингибиторов этого фермента. С использованием метода молекулярного докинга был проведен дизайн новых ингибиторов ДПП 4 на основе пептидомиметиков, содержащих С-концевые остатки циклических аминов, являющихся структурными аналогами пролина. Строение предложенных соединений может быть выражено общей формулой X-A-Y, где X=H, Ile, Ala, D-Ala; A=Pro, Ile; Y=Pyr (пирролидин), Рyraz (пиразол), NMP (N- метилпиперазин), Pip (пиперидин), Mf (морфолин). Синтез целевых соединений проводили методом активированных эфиров с использованием N-oксисукцинимида и пентафторфенола. Пептидомиметики были получены с выходами 67–88% и охарактеризованы методами ТСХ, ЯМР, масс-спектрометрии. Действие синтезированных соединений проверяли на препаратах ДПП 4 человека, очищенной ДПП 4 Tenebrio molitor, а также сложном мультиферментном комплексе личинок T. molitor. Для Pro-Pip, Pro-Mf,Ile-Pip, Ile-Mf определены IC50, значения которых сопоставимы, а в ряде случаев превосходят соответствующий показатель для известных пептидных ингибиторов ДПП 4 дипротина А (Ile-Pro-Ile) и дипротина В (Val-Pro-Leu). Было показано, что синтезированные ингибиторы совсем не ингибируют цистеиновые пептидазы, практически не влияют на химотрипсиновые, а, как мы и предполагали, более специфично действуют на ПСП, причем наилучший ингибирующий эффект достигается для ДПП 4. Работа выполнена при финансовой поддержке грантов РФФИ 15-03-06675-а, 15-04-08689-а, 16-34-01012-мол_а.