|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
«Получение и оптимизация реагентов для латекс-усиленного иммунотурбидиметрического определения концентрации С-реактивного белка в крови»дипломная работа (Магистр)
- Научные руководители: Белов А.А., Мирзабеков Т.А.
- Автор: М.А. Бикинеева
- Тип: Магистр
- Организация, в которой проходила защита: ФГБОУ ВО «Российский химико-технологический университет имени Д.И. Менделеева»
- Год защиты: 2018
- Аннотация: АННОТАЦИЯ Для диагностики различных заболеваний широко применяются всевозможные маркеры, одним из которых является С-реактивный белок (СРБ). Он вырабатывается в организме на воспалительные стимулы достаточно быстро (в течение 6 часов), достигает пика в 24-72 часа и так же быстро выводится из организма (период полувыведения 19 часов). Существует много методов для измерения уровня СРБ в крови, в основном они представляют собой иммунохимические методы анализа. Наибольшее распространение в последнее время получил иммунотурбидиметрический метод, как наиболее простой в исполнении и сравнительно дешевый, но обладающий требуемой чувствительностью. В данной работе был разработан иммунотурбидиметрический анализ на основе латексных микрочастиц и уникальных рекомбинантных анти-СРБ антител (MD1 и MD2). Использованные антитела характеризуются высокой афинностью и термостабильностью. В работе показано, что они также обладают и разной иммунореактивностью. На основе этих свойств были подобраны оптимальные условия получения латексного реагента: концентрация латекса (0,03 – 0,13 % в реакционной смеси), количество адсорбируемого антитела на поверхности микрочастицы (0,36-0,54 мг/м2) и BSA (стабилизатор коллоидной системы), соотношение антител MD1/MD2 (1:5-1:9). Для получения широкого аналитического диапазона и высокой чувствительности в реакционной системе должны присутствовать вещества, контролирующие скорость реакции, с этой целью был получен реакционный буфер, создающий оптимальную среду для эффективной агглютинации. Были изучены вещества, замедляющие реакцию, среди них оказались EDTA, соли аммония и хлорид натрия, ускоряющие реакцию (PEG6000, Triton X-100, SDS), не влияющие на скорость ее протекания в при определенных концентрациях (Tween 20 и кокамидопропилбетаин). Полученные реагенты были применены для анализа уровня С-реактивного белка в контрольных сыворотках в универсальном диапазоне, значения были измерены верно в пределах диапазона, установленного производителем. Магистерская диссертация изложена на 80 страницах, иллюстративные материалы в виде 50 рисунков, 14 таблиц и список литературы из 71 наименований, из них 67 зарубежных авторов.
- Добавил в систему: Белов Алексей Алексеевич