|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Структурные исследования оксидазы D-аминокислот из дрожжей Trigonopsis variabilis методом направленного мутагенезадипломная работа (Специалист)
- Научный руководитель: Тишков В.И.
- Автор: Черскова Наталья Владимировна
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Год защиты: 2009
- Аннотация: 1. Методом направленного мутагенеза получены мутантные формы TvDAAO с аминокислотными заменами Arg220Glu, Arg(169,220)Ala. Показано, что остатки Arg169 и Arg220 играют важную роль в поддержании димерной структуры фермента, а их замена на другие остатки приводит к получению нерастворимых активных форм фермента. 2. Изучена субстратная специфичность мутантных TvDAAO Arg220Glu и Arg(169,220)Ala. Показано, что у полученных мутантов значительно изменился профиль субстратной специфичности, причем с большинством D аминокислот наблюдается ухудшение кинетических. 3. Изучена температурная стабильность мутантных TvDAAO Arg220Glu и Arg(169,220)Ala. Показано, что кинетика инактивации полученных мутантов аналогична таковой для фермента дикого типа, введение замен сильно снижает термостабильность фермента. 4. Методом направленного мутагенеза получена мутантая форма TvDAAO Cys298Ala. Показано, что остаток Cys298 играет очень важную роль в стабильности фермента.
- Добавил в систему: Тишков Владимир Иванович