|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Анализ интерактома фактора Zeb1 при индукции эпителиально-мезенхимного перехода в клетках карциномы молочной железыдипломная работа (Бакалавр)
- Научные руководители: Миттенберг А.Г., Романовская Е.В.
- Автор: Поздняков Д.Ю.
- Тип: Бакалавр
- Организация, в которой проходила защита: Санкт-Петербургский государственный университет
- Год защиты: 2019
- Аннотация: Рак молочной железы – наиболее часто диагностируемое злокачественное новообразование, а также вторая по частоте причина смертности среди женщин с онкологическими заболеваниями. Особое значение в канцерогенезе представляет процесс метастазирования, который чаще всего и является причиной летальных исходов. Эпителиально-мезенхимный переход – один из основных путей образования вторичных опухолевых узлов и перспективная область для поиска терапевтических мишеней. Транскрипционный фактор Zeb1 играющий важную роль в канцерогенезе, является одним из основных регуляторов эпителиально-мезенхимного перехода. Активность Zeb1 регулируется за счет взаимодействия с различными белками, среди которых производился поиск потенциальных мишеней для терапевтического воздействия на фактор Zeb1 и метастазирование. Исходя из вышесказанного, целью работы является поиск в интерактоме фактора Zeb1 потенциальных мишеней для воздействия на метастазирование рака молочной железы. Для достижения цели необходимо: провести индукцию эпителиально-мезенхимного перехода в клетках карциномы молочной железы и подтвердить её методами флуоресцентной микроскопии и иммуноблоттинга; осуществить иммунопреципитацию интерактома фактора Zeb1 с последующей масс-спектрометрической идентификацией входящих в него белков; провести анализ белков-интерактантов фактора Zeb1 и оценка их возможной роли в эпителиально-мезенхимном переходе. Иммунопреципитацией выделен интерактом фактора Zeb1из клеток карциномы молочной железы на разных стадиях эпителиально-мезенхимного перехода и исследован методом LC-MALDI TOF/TOF масс-спектрометрии. В результате исследования сделано несколько выводов: 1. С помощью иммуноблоттинга подтверждено изменение содержания специфических белковых маркеров, виментина (мезенхимального) и Е-кадгерина (эпителиального), при индукции ЕМТ в клетках MCF7/Zeb1. 2. Методом тандемной времяпролетной масс-спектрометрии продемонстрированы достоверные различия по белковому составу в интерактоме транскрипционного фактора Zeb1 на ранних (24 ч) и поздних (72 ч) стадиях ЕМТ. 3 Обнаруженные белки (ADAR, DDX17, CTBP2, SRSF3, MPG, TDP-43), относящиеся к интерактантам Zeb1, представляются перспективными мишенями для разработки новых противораковых терапевтических подходов.
- Добавил в систему: Миттенберг Алексей Георгиевич