Аннотация:Одним из перспективных направлений современной биоаналитической химии является разработка безреагентных (не требующих добавления реагентов извне за исключением аналита) оптических сенсорных элементов на основе пероксидазы из корней хрена для определения широкого круга биологически активных веществ. Этот коммерчески доступный фермент катализирует реакции окисления различных органических соединений (субстратов-восстановителей) пероксидом водорода (основным субстратом-окислителем) и используется в качестве иммуно- и ДНК-метки в соответствующих методах.
В настоящее время известно большое количество сенсорных систем на основе пероксидазы и ее субстратов-восстановителей, иммобилизованных в различные твердые матрицы (пленки, гели и пр.). Однако ключевым недостатком/ограничением таких сенсоров по-прежнему является необходимость добавления ряда реагентов извне (ex situ).
К таким соединениям относятся, например, субстраты-восстановители пероксидазы, когда они служат в качестве хромофорных или флуорогенных индикаторных веществ в системах для определения пероксидов или непосредственно пероксидазы в различных объектах. И если проблема включения вторых субстратов пероксидазы в различные твердые матрицы является более проработанной, то предложенные в литературе различные способы стабилизации основного субстрата (пероксида водорода) не дали существенных результатов.
Перспективным для решения указанной проблемы, по мнению авторов настоящей работы, может служить подход, основанный на генерации пероксида водорода внутри сенсорного элемента (так называемая in situ генерация субстрата).
В связи с этим целью работы была разработка новых подходов к созданию безреагентных оптических (фотометрических и флуоресцентных) сенсорных систем на основе пероксидазы, а также их апробация для определения как самого фермента, так и пероксидов различного строения, ряда витаминов.
