|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Влияние регуляторного фактора Dnmt3L на метилирование 30-звенного ДНК-субстрата ДНК-метилтрансферазой мыши Dnmt3a и ее мутантными формамикурсовая работа (Специалист)
- Научные руководители: Кирсанова О.В., Громова Е.С.
- Автор: Лойко А.Г.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Кафедра химии природных соединений
- Год защиты: 2018
- Курс: 4
- Аннотация: Метилирование ДНК является предметом пристального изучения, поскольку оно играет важную роль в регуляции многих клеточных процессов. У прокариот метилирование ДНК обеспечивает защиту клетки от внедрения чужеродной ДНК. У эукариот оно отвечает за контроль экспрессии генов, поддержание целостности генома и другие жизненно важные функции. В клетках млекопитающих метилирование осуществляется по C5-положению остатков цитозина, расположенных преимущественно в участках CpG. Процесс метилирования не является случайным, модифицированные CpG-участки образуют профиль метилирования, который создается de novo в процессе эмбриогенеза ДНК-метилтрансферазой Dnmt3a с участием регуляторного белка Dnmt3L, который активирует работу Dnmt3a. Гиперметилирование некоторых генов, как и общее гипометилирование способствует развитию злокачественных опухолей, поэтому правильная работа ДНК-метилтрансфераз является необходимой для нормального эмбрионального развития млекопитающих. Согласно данным РСА, комплекс Dnmt3a-Dnmt3L является линейным гетеротетрамером 3L-3a-3a-3L, содержащим поверхность 3a-3a, на которой располагаются два активных центра на расстоянии 14 п.н. Роль Dnmt3L заключается в активации работы Dnmt3a. Предполагается, что белковый комплекс способен за один акт связывания субстрата метилировать одновременно два CpG-сайта. В настоящее время активно изучают детали механизма работы Dnmt3a. Пристального внимания заслуживают исследования, посвященные недавно найденным мутантам каталитического домена данного фермента (Dnmt3a-CD). У больных раком крови ген dnmt3a часто мутирует, однако последствия таких событий практически не изучены.Целью курсовой работы стало определение кинетических параметров реакции Dnmt3a-CD с 30-звенным ДНК-субстратом, а также выделение фактора Dnmt3L и установление влияния данного белка на способность мутантных форм Dnmt3a-CD к метилированию ДНК.
- Добавил в систему: Кирсанова Ольга Вячеславовна