|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Биохимическая характеристика рекомбинантной FOF1 ATФ-синтазы Bacillus subtilisкурсовая работа (Специалист)
- Научные руководители: Фенюк Б.А., Лапашина А.С.
- Автор: Третьяков Данила Олегович
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Факультет биоинженерии и биоинформатики
- Год защиты: 2019
- Курс: 2
- Аннотация: АТФ-синтаза F-типа (FOF1-комплекс) является краеугольным камнем клеточной биоэнергетики бактерий, митохондрий и хлоропластов. Этот фермент синтезирует более 90% АТФ, необходимого большинству организмов для жизни. Комплекс FOF1 использует энергию трансмембранного электрохимического градиента протонов, генерируемого цепями переноса электронов. Энергия, получаемая ферментом при транспорте протонов через мембранный субкомплекс FO, используется для синтеза АТФ из АДФ и неорганического фосфата (Pi) гидрофильным субкомплексом F1. Несмотря на значение и распространенность FOF1-АТФ-синтаз, среди бактерий достаточно полно охарактеризованы только ферменты Escherichia coli и Bacillus sp. PS3. В то же время, АТФ-синтаза Bacillus subtilis - важного объекта для биотехнологии и исследований - до сих пор практически не изучена. Целью нашей работы было показать, какое влияние на активность FOF1 B. subtilis оказывают различные факторы. Также стоит отметить, что в отличие от E. coli и Bacillus sp. PS3, адаптированных к специфическим условиям существования, B. subtilis - свободноживущая, вынужденная приспосабливаться к разным температурам и уровням кислорода бактерия. Изучение её фермента поможет понять регуляцию и принципы работы FOF1 АТФ-синтазы свободноживущих мезофильных прокариот и даст материал для сравнения с организмами из других экологических ниш. В ходе работы был выделен рекомбинантный фермент B. subtilis, измерения проводились на белке, встроенном в липосомы. На нем были измерены зависимость АТФазной активности от температуры и pH и было обнаружено два pH-оптимума. Также была измерена скорость гидролиза АТФ в зависимости от концентрации Pi при различных pH. Известно, что фосфат активирует гидролиз АТФ ферментом из Bacillus sp. PS3. Однако у B. subtilis добавление Pi не влияло на гидролиз АТФ или показывало ингибирующий эффект. Полученные данные указывают на отличие в регуляции и работе АТФ-синтаз разных видов бактерий.
- Добавил в систему: Лапашина Анна Сергеевна