|
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Эффект росиглитазона на воспалительный ответ в глиальных клетках С6курсовая работа (Специалист)
- Научный руководитель: Чистяков Дмитрий Викторович
- Автор: Панкевич Е.В.
- Тип: Специалист
- Организация, в которой проходила защита: МГУ имени М.В. Ломоносова
- Кафедра: Факультет биоинженерии и биоинформатики
- Год защиты: 2015
- Курс: 3
- Аннотация: В последнее время стало ясно, что при развитии клеточных ответов при стимуляции толл-подобных рецепторов важную роль играет регуляция скорости деградации мРНК активирующихся генов, маркеров воспаления на клеточном уровне. Встал вопрос о поиске низкомолекулярных веществ, способных модулировать эти процессы. В работе исследована модуляция росиглитазоном экспрессии циклооксигеназы 2 (СОХ-2), ключевого фермента синтеза простагландинов и классического маркера воспаления. Росиглитазон является лекарственным препаратом, который предлагается как перспективное средство для регуляции воспалительного ответа в клетках центральной нервной системы. Исследование проводилось на клетках глиальной опухоли крысы С6. Стимуляцию воспалительного ответа вызывали липополисахаридом (LPS). Методом иммуноферментного анализа определяли концентрацию простагландина Е2 (PGE2), ПЦР в реальном времени использовали для определения уровня мРНК. Показано, что стимуляция LPS приводит к росту выброса PGE2 во внеклеточную среду в 6 раз относительно контрольных клеток, что коррелирует с увеличением уровня экспрессии мРНК COX-2. Росиглитазон снижает LPS-стимулированный выброс PGE2 в 2 раза, что также коррелирует со снижением уровня экспрессии мРНК СОХ-2. Для определения молекулярного механизма действия росиглитазона, проведена оценка стабильности мРНК СОХ-2. Клетки инкубировали с LPS 1 час, затем добавляли актиномицин D, который блокировал образование новых транскриптов, и измеряли уровень мРНК через различные временные интервалы. Обработку росиглитазоном проводили за 30 минут до добавления LPS. Установлено, что время полужизни СОХ-2 составляет около 75 минут в нативных клетках, стимуляция LPS замедляет скорость деградации до 120 минут, а обработка росиглитазоном нормализует этот процесс до исходного уровня. Таким образом, показана возможность модуляции скорости деградации мРНК СОХ-2 росиглитазоном, что открывает новые терапевтические перспективы применения этого соединения.
- Добавил в систему: Чистяков Дмитрий Викторович