ИСТИНА

Цель работы: оптимизация способов индукции культур бородатых корней модельных и хозяйственно-ценных растений и изучение их физиологических характеристик. Основные задачи исследования: 1. Подобрать оптимальные условия индукции бородатых корней для Withania somnifera, Parasponia andersonii, Taraxacum kok-saghyz и Taraxacum hybernum; 2. Провести скрининг нуклеотидных последовательностей фрагмента Т-ДНК известных штаммов A. rhizogenes и получить модифицированный линейный ампликон, содержащий все 4 rol-гена; 3. Испытать метод биобаллистической трансформации линейной ДНК, содержащей все 4 rol-гена, на модельном обьекте Nicotiana tabacum и на представителе однодольных Triticum aestivum; 4. Изучить физиологические характеристики линий адвентивных корней, полученных с использованием различных методов. Положения, выносимые на защиту: 1. Культуры бородатых корней витании и каучуконосных одуванчиков, полученные методом агробактериальной трансформации, могут быть использованы для продуцирования ценных вторичных метаболитов: витанолидов и натурального каучука, соответственно. 2. Культура hairy roots табака характеризуется повышенной экспрессией гена циклин-зависимой протеинкиназы CDKB1-1 и агробактериального гена rolC. 3. Бородатые корни могут быть получены путем биобаллистической трансформации с использованием линейного ампликона, содержащего 4 rol-гена Agrobacterium rhizogenes. ВЫВОДЫ: 1. Оптимизированы способы индукции бородатых корней Withania somnifera, Parasponia andersonii, Taraxacum kok-saghyz и Taraxacum hybernum и получены их in vitro культуры, которые могут быть использованы в фундаментальных исследованиях и для продуцирования ценных вторичных метаболитов. 2. Предложен новый способ получения бородатых корней путем биобаллистической трансформации с использованием линейного ампликона, содержащего все 4 rol-гена Agrobacterium rhizogenes, который может стать основой при дальнейшей разработке универсальных методов индукции hairy roots. 3. Обнаружена способность культуры зеленых адвентивных корней Triticum aestivum к быстрому и долгосрочному росту на безгормональной среде, что делает ее привлекательной альтернативной истинным бородатым корням системой для продукции вторичных метаболитов у злаковых. 4. Показана положительная корреляция уровня экспрессии трансгена rolC и хозяйского гена CDKB1-1 с быстрым ростом hairy roots табака.