ИСТИНА

Целью работы явилось обнаружить эффективные усилители хемилюминесцентного сигнала, продуцируемого анионными пероксидазами, и продемонстрировать преимущества их применения при разработке высокочувствительных иммуноферментных тест-систем с хемилюминесцентной детекцией. При скрининге различных производных фенотиазина впервые показано, что 3-(10’-фенотиазинил)-пропан-1-сульфонат (ФТПС) и 3-(10’-фенотиазинил)-пропионовая кислота являются эффективными усилителями люминол-зависимого хемилюминесцентного сигнала, продуцируемого анионными пероксидазами. Впервые для анионных пероксидаз был продемонстрирован эффект вторичного усиления хемилюминесцентного сигнала: обнаружено, что производные пиридина, такие как 4-диметиламинопиридин, 4-морфолинопиридин или 4-пирролидинопиридин, способны значительно повышать усиливающий эффект ФТПС. Показано, что предел обнаружения пероксидазы сои в случае использования системы усиления, включающей ФТПС и 4-морфолинопиридин, равен 0.03 пМ. Данная величина более чем в 30 раз ниже по сравнению с пределом обнаружения пероксидазы хрена, получаемым с помощью традиционного усилителя (4-йодофенола). Дополнительным преимуществом разработанной детектирующей системы является ее высокая стабильность в течение длительного периода времени хемилюминесцентного сигнала. Продемонстрировано, что использование разработанной детектирующей системы на основе коммерчески доступной анионной пероксидазы сои вместо традиционно используемой пероксидазы хрена в составе иммуноферментных наборов с хемилюминесцентной детекцией позволяет существенно улучшить их качество за счет понижения предела обнаружения, расширения линейного диапазона определяемых концентраций и большей стабильности хемилюминесцентного сигнала во времени.