ИСТИНА

Малые белки теплового шока (sHsp) участвуют в поддержании белкового гомеостаза клеток. Нарушение функциональной активности sHsp коррелирует с различными заболеваниями, такими как катаракта, нейродегенеративные и онкологические заболевания. Для изучения sHsp используются химерные флуоресцентные белки. Однако в химерах свойства исходного белка могут изменяться под действием флуоресцентного белка. Цель работы - анализ структуры и свойств химерных флуоресцентных белков, состоящих из различных sHsp человека и флуоресцентных белков ECFP или EYFP. В ходе выполнения подобраны условия экспрессии и разработана методика выделения флуоресцентных химер. Впервые получены препаративные количества флуоресцентных химер sHsp в гомогенном состоянии. Методами гель-хроматографии, динамического лазерного светорассеяния и электронной микроскопии выявлены нарушения четвертичной структуры у химерных белков по сравнению с белками дикого типа. Применен метод измерения анизотропии флуоресценции для исследования обмена субъединиц флуоресцентных химер. Показано, что все химерные белки обладают нарушенной шапероноподобной активностью.