![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Формула изобретения 1. Рекомбинантная плазмида pCFP10-DBD с последовательностью №1, обеспечивающая экспрессию рекомбинантного белка CFP10-sp-DBD, состоящего из фрагмента белка CFP10 из М. tuberculosis, Gly-Ser спейсера, декстрансвязывающего домена DBD из Leuconostoc citreum, размером 3771 п.н., состоящая из следующих структурных элементов: - искусственный бактериальный оперон рекомбинантного белка CFP10-sp-DBD, включающий: промоторную область раннего промотора бактериофага Т5 (7-87 п.н.), ген рекомбинантного белка CFP10-sp-DBD (117-869 п.н), нетранслируемую область терминации транскрипции (9091596 п.н.); - бактериальный оперон бета-лактамазы, обеспечивающий устойчивость к ампицилину (2786-3646 п.н.); - бактериальный участок инициации репликации типа ColEl (20282038 п.н.), обеспечивающий репликацию плазмиды в штаммах Е.coli. 2. Рекомбинантный штамм E.coli M15 [pREP4, pCFP10-DBD], полученный трансформацией штамма E.coli M15 [pREP4] плазмидой по п. 1, продуцент белка CFP10- DBD. 3. Способ получения иммобилизованного очищенного рекомбинантного белка CFP10-DBD на декстране, включающий выращивание клеток штамма E.coli M15 [pREP4, pCFP10-DBD] по п. 2, для концентрирования целевого продукта и его очистки путем иммобилизации белка CFP10-DBD в составе клеточных экстрактов штамма E.coli M15 [pREP4, pCFP10-DBD] на декстрановом сорбенте за счет аффинного взаимодействия при процедуре инкубации с последующей отмывкой от несвязавшихся бактериальных белков, и выделение целевого продукта. 4. Иммуногенная композиция, специфически активирующая Т-лимфоциты, синтезирующие ИФН-гамма при стимуляции антигенами микобактерий, содержащая рекомбинантный белок CFP10-DBD с молекулярной массой 27,3 кДа, включающий полноразмерный белок CFP10 с последовательностью №2, Gly-Ser спейсер с последовательностью №3 и декстрансвязывающий домен декстрансукразы Leuconostoc citreum КМ20 с последовательностью №4.