ИСТИНА

Изобретение относится к биотехнологии, генной инженерии, биохимии, медицине, ветеринарии. Получают синтетическую последовательность ДНК, соответствующую гену, кодирующему белковую последовательность гепаринсвязывающего домена (HBD) из Danio rerio, слитую с последовательностью эритропоэтина (Еро) человека (белок HBD-Epo), спланированную таким образом, чтобы нуклеотидный состав кодонов был оптимизирован для гетерологичной экспрессии в непатогенном лабораторном штамме Е. coli. Этот синтетический ген HBD-Epo фланкируют на 5'-конце сайтом NcoI, а на 3'-конце - сайтом Kpn2I и встраивают в плазмиду pQE6 по сайтам NcoI и Kpn2I. На его основе получают рекомбинантную плазмиду pL610, содержащую искусственный бактериальный оперон рекомбинантного белка HBD-Epo, включающий промоторную область раннего промотора бактериофага Т5, ген рекомбинантного белка HBD-Epo, терминатор транскрипции; бактериальный оперон бета-лактамазы; бактериальный участок инициации репликации типа ColE1, кодирующую рекомбинантный белок HBD-Epo и обеспечивающую его синтез в штаммах Е. coli. Изобретение также включает способ очистки белка HBD-Epo методом ионообменной хроматографии. Изобретение относится к самому рекомбинантному белку HBD-Epo, экспрессионному вектору pL610 и композиции (деминерализованному костному матриксу (ДКМ), содержащему белок HBD-Epo, а также ДКМ, содержащему белок HBD-Epo и ВМР-2), направленной на стимулирование остеогенеза. Изобретение позволяет получать устойчивый очищенный активный белок HBD-Epo, а также HBD-Epo, иммобилизированный на ДКМ, в том числе на ДКМ с костным морфогенетическим белком ВМР-2. Изобретение, кроме того, включает способ специфической индукции регенерации костной ткани, заключающийся в заполнении дефектов костной ткани композицией, состоящей из HBD-Epo, иммобилизированного на ДКМ, в том числе на ДКМ с костным морфогенетическим белком ВМР-2.