ИСТИНА

Изобретение относится к области биотехнологии, ветеринарной микробиологии и генетической инженерии и может применяться для детекции токсигенных Pasteurella multocida в различном биологическом материале. Способ включает подготовку образца, выделение ДНК, проведение полимеразной цепной реакции c гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени с использованием набора олигонуклеотидов для совместной амплификации генов kmt1 и toxAPasteurella multocida, содержащего прямые - Pm_F 5'-TGCCACTTGAAATGGGAAATG-3'; toxA_F 5'-CAGTGAAAGCACGGCTGA-3' и обратные -Pm_R 5'-AATAACGTCCAATCAGTTGCG-3'; toxA_R 5'-CATAAGCAGGAAGTTCCCAGT-3' праймеры и флуоресцентно-меченые зонды Pm_Z 5'-R6G-TGTGAGTGGGCTTGTCGGTAGTCT-BHQ-3'; toxA_Z 5’-Cy5-TCAGCGCCTTTTCGCGGATATGCTG-BHQ-3’, и реакционной смеси. Результаты амплификации оценивают с помощью программного обеспечения амплификатора, при этом результаты интерпретируют на основании наличия или отсутствия пересечения кривой флуоресценции с установленной на уровне 0,05 пороговой линией и диагностируют наличие генома бактерии Pasteurella multocida и гена токсина toxA. Способ позволяет осуществлять быстрое подтверждение присутствия токсигенных вариантов Pasteurella multocida в культурах и образцах биологического материала: респираторных смывах и внутренних органов от разного вида животных: свиней, КРС, МРС, кроликов, птицы, при высокой чувствительности и специфичности. 2 ил., 1 табл., 2 пр.