![]() |
ИСТИНА |
Войти в систему Регистрация |
ИСТИНА ЦЭМИ РАН |
||
Изобретение относится к области клеточной биологии и биотехнологии, а именно к получению культуры мезенхимных стволовых клеток человека (МСК) из периваскулярного пространства пупочного канатика. Способ включает вырезание фрагмента пупочного канатика, заполнение его 0,2% раствором коллагеназы, закрывание обоих его концов и выдерживание в течение 20-40 минут при температуре 37°С с последующим промыванием сбалансированным солевым раствором, заполнением новой порцией 0,2% раствора коллагеназы, закрыванием обоих его концов и выдерживанием в течение 30-60 минут при температуре 37°С. После второго выдерживания упомянутую пупочную вену промывают сбалансированным солевым раствором, полученную при промывке жидкость центрифугируют и культивируют полученный осадок на селективных средах. Изобретение позволяет повысить выход и чистоту получаемой культуры МСК и в ряде случаев уменьшить время получения МСК. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 3 пр. Формула изобретения 1. Способ получения культуры мезенхимных стволовых клеток человека из периваскулярного пространства пупочного канатика, заключающийся в том, что вырезают фрагмент пупочного канатика, заполняют вену упомянутого фрагмента пупочного канатика 0,2% раствором коллагеназы, закрывают оба конца упомянутого фрагмента пупочного канатика и выдерживают его в течение по меньшей мере 20 минут, но не более 40 минут при температуре 37°С, отличающийся тем, что после этого упомянутую вену промывают сбалансированным солевым раствором, заполняют новой порцией упомянутого раствора коллагеназы, закрывают оба конца упомянутого пупочного канатика и выдерживают в течение по меньшей мере 30 минут, но не более 60 минут при температуре 37°С, после этого упомянутую вену промывают сбалансированным солевым раствором, полученную при промывке жидкость центрифугируют, полученный осадок культивируют на селективных средах. 2. Способ получения культуры мезенхимных стволовых клеток человека из периваскулярного пространства пупочного канатика по п. 1, отличающийся тем, что жидкость, полученную при промывке после первого цикла инкубации в 0,2% растворе коллагеназы, собирают, центрифугируют, полученный осадок культивируют на селективных средах, а полученную культуру клеток добавляют к культуре, полученной по п. 1