ИСТИНА

Проведено исследование транскрипции 11 ретротранспозонов-ретровирусов группы gypsy (gypsy, ZAM, 17.6, 297, Tirant, springer, rover, Quasimodo, opus, Idefix и gypsy (содержат 3 ОРС) и Transpac (2 ОРС)) в линиях дрозофилы, мутантных по гену flamenco, контролирующему транспозиции gypsy, и линии flamenco+. Показана тканеспецифичность экспрессии ретротранспозонов. Установлено существование общего механизма контроля экспрессии и транспозиции для большинства ретроэлементов группы gypsy со стороны гена flamenco. Анализ транскрипции ретротранспозонов у гибридов, генотипы которых несут разные сочетания flamenco и мутаций генов dicer и piwi, работающих в piwi-пути РНК-интерференции показал, что flamenco и гены РНК-интерференции, входящие в piwi-путь, действуют независимо друг от друга. В линиях flamenco, подвергнутых анализу, piwi-путь РНК-интерференции не нарушен. Проведен генетический (гибридологический) и молекулярный анализ взаимодействия локусов flamenco и piwi. Показано, что гены piwi и flamenco в тканях семенников взаимодействуют комплементарно.

The research of a transcription of 11 retrotranspozonov-retroviruses of the gypsy group is conducted (gypsy, ZAM, 17.6, 297, Tirant, springer, rover, Quasimodo, opus, Idefix and gypsy (support 3 OPC) and Transpac (2 OPC)) in lines of a drosophila, mutant on flamenco gene controlling gypsy transpositions, and the flamenco lines. The tkanespetsifichnost of an expression of retrotranspozon is shown. Existence of the general mechanism of control of an expression and transposition for the majority of retroelements of the gypsy group from flamenco gene is established. The analysis of a transcription of retrotranspozon at hybrids which genotypes bear different combinations of flamenco and mutations of genes of dicer and piwi working in a piwi-way of a RNA interference has shown that flamenco and genes of a RNA interference entering a piwi-way work independently from each other. In the flamenco lines subjected to the analysis, the piwi-way of a RNA interference isn't broken. The genetic (hybridological) and molecular analysis of interaction of loci of flamenco and piwi is carried out. It is shown that genes of piwi and flamenco in tissues of testicles interact complementary.

1. Будут разработаны детальные схемы для всех запланированных экспериментов (перечисленных в пункте 4.2.). 2. Будет созданы все необходимые молекулярные зонды и конструкции для решения поставленных задач. 3. Будут синтезированы все линии дрозофилы, необходимые для проведения генетических и молекулярно-генетических экспериментов. 4. Будет выделена интеграза gypsy и исследована специфичность ее действия на кольцевые (плазмидные) и линейные матрицы. 5. Будут исследованы свойства N-концевого и C-концевого доменов интегразы gypsy in vitro. 6. Будет исследована РНК-связывающая активность геномного гомолога гена gag gypsy Drosophila melanogaster, а также клонирован и изучен с точки зрения экспрессии ген env gypsy. 7. Будут созданы генетические конструкции (линии), сочетающие гены flamenco и РНК-интерференции Drosophila melanogaster. 8. Будет изучена экспрессия РНК gypsy в созданных линиях. 9. Будет изучена эволюция и основные этапы формирования ретротранспозонов группы gypsy и созданы классификация и схема филогении этих элементов. 10. Будут написаны и направлены в печать 3 статьи в рецензируемые журналы.

олученные результаты приоритетны и полностью соответствуют мировому уровню. Все данные, полученные в результате исследований являются оригинальными и получены впервые. Обнаруженные закономерности показаны впервые в мировой научной практике, они существенно расширяют представления о функциях генов генома дрозофилы, являющихся структурными аналогами генов ретротранспозонов, взаимоотношениях ретротранспозонов, ретровирусов и хозяйского генома, формируют представление о геноме как открытой системе, в которой могут распространяться гены и генетические элементы других биологических видов путем горизонтального и вертикального переноса. Показано, что хозяйский геном может доместицировать гены своих "паразитических" элементов - ретротранспозонов, приспосабливая их к новым функциям (молекулярная экзаптация).

Проект направлен на решение фундаментальной проблемы, связанной с устойчивостью и гомеостазом генома, а также приобретением им новых структурных элементов и свойств. Он посвящен поиску генов и изучению молекулярных механизмов регуляции транспозиции мобильных элементов и в случае ретротранспозонов-эндогенных ретровирусов беспозвоночных (эррантивирусов) – регуляции их инфекционных свойств. Важное имеет анализ взаимодействия собственных генов мобильных элементов и генов хозяйского генома. В проекте решается вопрос возникновения новых ретротранспозонов, поиска источников их генов и путей естественного формирования активных ретровирусов, которые в дальнейшем оказывают большое влияние на эволюцию тех видов, в геномах которых они возникают. Эти вопросы неразрывно связаны с избыточностью генетического материала живых организмов и механизмами горизонтального (в том числе и межвидового) переноса наследственного материала. Восстановлению эволюционного прошлого мобильных элементов служит создание их классификации и системы на основании анализа структурных и функциональных особенностей.