ИСТИНА

Проект направлен на проведение микробиологических, биогеохимических и молекулярно-экологических исследований процесса сульфатредукции (СР) и выявление доминирующих форм сульфатредуцирующих прокариот в аэробных водах, хемоклине и верхней части анаэробной водной толщи глубоководной зоны российского сектора Черного моря. На основании детальных радиоизотопных исследований в сочетании с гидрохимическим анализом распределения различных неорганических соединений серы, будут получены количественные оценки скорости СР и выявлены горизонты с максимальной интенсивностью этого процесса. Из этих горизонтов планируется выделить моно- и чистые культуры сульфатредуцирующих прокариот, выявить их субстратную специфичность и уровень устойчивости к присутствию кислорода в культуральной среде. Использование широкого набора молекулярных зондов позволит в разных гидрологических слоях водной толщи Черного моря, а также в накопительных культурах, методом флуоресцентной in situ гибридизации выявить присутствие, определить численность и идентифицировать основные группы сульфатредукторов.

Отбор проб воды для микробиологических и гидрохимичекских исследований проводился на станции с глубиной 1000 м, расположенной в пределах континентального склона российского сектора Черного моря. Образцы отбирали в интервале глубин 0-200 м. В этом интервале глубин для микробиологических и гидрохимических исследований отобрана вода с 18-ти горизонтов. На борту судна образцы воды с соответствующих глубин разливали по склянкам для следующего вида анализов: (1) определение содержания О2, H2S, сульфата, сульфита, тиосульфата, общей щелочности, фосфатов, полифосфатов, нитратов, нитритов, аммония, мочевины и Сорг; (2) определение интенсивностей процессов сульфатредукции и темновой ассимиляции углекислоты радиоизотопным методом; (3) определение общей численности микроорганизмов с использованием флуоресцентной микроскопии, а также численности сульфатредуцирующих бактерий методом флуоресцентной гибридизации in situ (FISH); (4) выделение накопительных культур сульфатредуцирующих бактерий; (5) выделение хромосомной ДНК с последующим анализом распределения сульфатредуцирующих бактерий в водной толще Черного моря с помощью молекулярного клонирования генов 16SрРНК и функционального гена dsrAB. Измерения основных гидрохимических параметров выполненные нами в начале июля 2010 года, соответствовали типичной летней гидрофизической структуре до прихода вод нового Холодного Промежуточного Слоя (ХПС). Сезонный термоклин располагался на глубине 30-40 м, температура на горизонтах ХПС немного превышала 8 оС. Галоклин располагался в слое 100-160 м. Слой оксиклина совпадал с галоклином, кислород достигал значений 10 мкМ на горизонте 140 м и падал до нижнего предела обнаружения методом Винклера (<3 мкM) на глубине 160 м. Сероводород появился между горизонтами 167 и 172 м под максимумами окисленных форм марганца.