| 1 |
8 ноября 2023 г.-31 декабря 2023 г. |
Отработка получения бактериальных альгинатов бактериями рода Azotobacter для инкапсулирования эндолизинов |
| Результаты этапа: В результате проведенного исследования был отработан биосинтез бактериальных альгинатов бактериями рода Azotobacter с целью дальнейшего инкапсулирования эндолизинов. Для этого сначала был проведен скрининг 5-ти штаммов-продуцентов и условий их культивирования для контроля физико-химических свойств синтезируемых альгинатов и отобран наиболее продуктивный штамм-продуцент A. vinelandii 12. Проведен синтез альгината отобранным штаммом-продуцентом в 8-ми различных условиях, различающихся концентрацией источника углерода (сахарозы), концентрации фосфатов и уровня аэрации, и подобраны наиболее оптимальные условия биосинтеза. Отработан синтез 4-х типов бактериальных альгинатов: 3-х типов капсулярного альгината, различающихся молекулярной массой и 1-ого типа свободного низкомолекулярного альгината. Отработан метод выделения и очистки полученных 4-х типов бактериальных альгинатов в количествах достаточных для проведения исследований (1,0-2,1 г). |
| 2 |
1 января 2024 г.-30 апреля 2024 г. |
Наработка и исследование свойств бактериальных альгинатов для инкапсулирования эндолизинов |
| Результаты этапа: В результате проведенного исследования был отработан биосинтез бактериальных альгинатов бактериями рода Azotobacter с целью дальнейшего инкапсулирования эндолизинов. и отобран наиболее продуктивный штамм-продуцент A. vinelandii 12. подобраны наиболее оптимальные условия биосинтеза, который позволяет получать бактериальные альгинаты с заданным химическим строением. Отработан метод выделения и очистки полученных бактериальных альгинатов. Отработан синтез и наработаны 5 типов бактериальных альгинатов: 3 типа капсулярного альгината (АЛГ-1, АЛГ-2 и АЛГ-3) и 2 типа свободного низкомолекулярного альгината (АЛГ-4 и АЛГ-5), различающиеся молекулярной массой, соотношением мономеров маннуроновых и гулуроновых кислот в цепи полимера и уровнем ацетилирования, из которых были отобраны АЛГ-2 и АЛГ-3 для инкапсулирования и контролируемого высвобождения эндолизинов. С использованием отобранных бактериальных капсулярных альгинатов АЛГ-2 и АЛГ-3 были получены гидрогели альгината кальция различной концентрации: 0,5%, 1% и 2% для дальнейшего инкапсулирования эндолизинов, и показано, что они обладают подходящими показателями гелеобразования и водопоглощения (131% и 211%), которые позволяют получать альгинатные гидрогели с достаточно хорошими механическими свойствами. Было передано 5 партий альгинатов по Акту передачи образцов №1 общим весом 5,2 г. Отработан метод определения цитотоксичности эндолизинов в альгинатах на клетках линии 3T3. |
